母猪粪样孕酮 ELISA 检测方法的建立.docxVIP

第二章 母猪粪样孕酮 ELISA 检测方法的建立目前我国对粪样孕酮浓度检测的报道比较少，而相应的免疫检测试剂盒的开发应用更少。随着免疫学的发展，国外已有各种孕激素浓度检测的试剂盒，尤其奶牛乳汁孕酮检测试剂盒已经相当成熟。也有报道用奶牛乳汁孕酮检测试剂盒检测母猪粪样孕酮浓度进行研究，取得很好的结果。本实验以已制备出的孕酮多克隆抗体为基础，用辣根过氧化物酶标记孕酮，酶标孕酮与待检样品中的孕酮竞争性地与包被在固相上的孕酮抗体结合，从而建立起对母猪粪样孕酮进行检测的方法，并对检测条件进行优化 ，，为组装孕酮检测试剂盒奠定基础。材料1.1主要仪器设备表2-1实验仪器设备Tab.2-1 Instruments of experiments仪器名称型号生产厂家酶标仪ELX800美国Bio-TEK精密电子天平LIBROR AEG-120磁力搅拌器GL-3250B海门麒麟贝尔医用仪器厂酶标板96孔（8×12）美国康宁公司可拆酶标板96孔（12×8）美国康宁公司冰箱电热恒温鼓风干燥箱DHG-9240A上海齐欣科学仪器有限公司微量移液器美国 Thermo 公司高速离心机TG16-W微量涡旋混合仪XK96紫外可见分光光度计T6型北京通用仪器有限公司1.2 主要试剂表 2-2 实验试剂Tab.2-2 Reagents of experiments试剂名称生产厂家孕酮标准品Sigma公司Tween-20HRP