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一种复配型玛咖保健品对小鼠免疫功能的影响 作者：金文闻，张永忠，敖明章，余龙江 【摘要】 目的 探讨一种添加了西洋参总皂苷的玛咖保健品对小鼠细胞免疫功能、体液免疫功能、巨噬细胞吞噬功能以及NK细胞活性的影响。方法 实验组小鼠每日分别灌胃高、中、低剂量的复配玛咖根干粉，连续30天，然后分别进行ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验、小鼠半数溶血值测定、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验和NK细胞活性测定。结果 与对照组比较，各剂量组均能提高ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化能力、小鼠巨噬细胞吞噬能力和小鼠NK细胞活性，在中、高剂量组能提高小鼠的半数溶血值为十字花科独行菜属的一年生或两年生草本植物，原产于秘鲁海拔3500米以上的安第斯山区。数千年来玛咖根作为食物、草药被广泛用于增强精力，抗疲劳，提高生育力，治疗女性更年期综合征，抗抑郁和抗贫血等［1～3］，近十年更在国际上被开发成多种保健食品，受到全球保健人士的青睐［4］。我国也在3年前引入了玛咖保健品，但目前产品功能单一，与国际上产品在功效上有比较大差距。国际上已经流行将玛咖根粉进行浓缩或者进行复配，这不仅提高了玛咖保健品的功效，更赋予“Maca”这一国际知名品牌产品更多的适用范围，例如将玛咖与鹿茸、银杏提取物等天然产品复配后得到的产品，均得到国际消费者的喜爱。 玛咖具有显著的增强精力和抗疲劳作用［5］，而它虽然具有“适应原”样作用，但免疫调节作用并不显著［4］。鉴于抗疲劳和免疫调节具有密切联系［6］，添加合适比例的具有增强免疫力作用的天然植物提取物将可能使玛咖保健品具有抗疲劳和增强免疫力双重作用。我们将药食两用植物西洋参的功效成分——西洋参总皂苷按照合适的比例添加到玛咖根干粉中，以此为原料制备成一种复配型玛咖保健食品。本文就是通过实验对该产品在小鼠细胞免疫功能、体液免疫功能、巨噬细胞吞噬功能以及NK细胞活性等方面的影响进行考察，从而评价其在增强免疫力方面的功效。 1 材料与方法 材料 玛咖根干粉是由秘鲁利马AGRO NATURALES 于XX年9月提供；西洋参总皂苷粉是由中国广东省深圳思味特科技有限公司于XX年10月提供，含西洋参总皂苷≥80%。玛咖根干粉和西洋参总皂苷粉按照重量比93：7进行均匀混合，制备成复配型玛咖根干粉。常温保存，供实验用。 实验动物及受试方式 实验动物选用BALB/C清洁级雌性小鼠120只，体重18～22g，均由湖北省实验动物中心提供。将小鼠随机均分为8组，其中4组为免疫Ⅰ组，进行ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验、NK细胞活性测定；另4组为免疫Ⅱ组，进行小鼠半数溶血值测定、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验。 参考国内外玛咖根干粉和西洋参总皂苷的食用量，初步设计本次实验的剂量为每日 g/kg BW，上下再各设1个剂量组/kg BW 和/kg BW。因此免疫Ⅰ组和Ⅱ组各自的4组小鼠分别对应高、中、低3个剂量组和对照组。样品用蒸馏水配置，对照组以蒸馏水代替受试物。每日灌胃1次，每次20ml/kg BW，连续30天后测定各项指标。 实验方法 ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验［7］ 小鼠颈椎脱臼处死后，无菌取脾，置于盛有适量无菌Hanks液的皿中，制成细胞悬液。用Hanks液洗3次，每次1000rpm离心10min。然后将细胞悬浮于2ml的完全培养液中，计数活细胞数，调整细胞浓度为2×106个/ml。将细胞悬液分2孔加入24孔培养板中，每孔1ml，在其中1孔加50μl ConA液，另1孔作为对照，置5% CF-autoflow型CO2细胞培养箱中，37℃培养72h。培养结束前4h，每孔轻轻吸去上清液，加入不含小牛血清的RPMI 1640培养液，同时加入MTT50μl/孔，继续培养4h。培养结束后，每孔加入1ml酸性异丙醇，吹打均匀，使紫色结晶完全溶解。然后分装到酶标微孔板中，每孔做3个平行孔，用∑960型全自动酶标仪，以570nm波长测定光密度值。淋巴细胞的增值能力用加ConA孔的光密度值减去不加Co {一种复配型玛咖保健品对小鼠免疫功能的影响 http://欢迎您访问范--文.之.家} nA孔的光密度值表示。 半数溶血值的测定［8，9］ 取羊血，生理盐水洗涤3次，每只鼠经腹腔注射2%压积SRBC 进行免疫。5天后，小鼠摘眼球取血于离心管内，放置约1h，将凝固血与管壁剥离，使血清充分析出，2000rpm离心10min，收集血清。用SA缓冲液将血清稀释为400倍，取1ml置试管内，依次加入10%压积SRBC ，补体1ml。另设不加血清的对照管。置37 ℃恒温水浴中保温30min后，冰浴终止反应。20