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第5章 核糖体与蛋白质的生物合成 概 述 *全称:核糖核蛋白体(核蛋白体) *由几种rRNA 和几十种蛋白构成。 *主成分rRNA(60%)和 r蛋白(40%) *非膜性的颗粒状结构(游离or附着) *直径12~30nm,存在所有细胞。 *1958年,Robinsin和Brown发现。 正在工作的核糖体(电镜观) 核糖体的大小亚基 5.1 核糖体化学组成与形态结构5.1.1 化学组成 线粒体(哺乳类): 55S核糖体(35S + 25S) * 真核细胞:80S核糖体(60S+40S) 60S ---3种rRNA(28S、5.8S、5S) + 49种蛋白。 40S ---1种rRNA(18S)+ 33种蛋白。 * 原核细胞:70S核糖体(50S+30S) 50S----2种rRNA(23S、5S)+34种蛋白。 30S----1种rRNA (16S) + 21种蛋白。 5.1.2 核糖体的超微结构 核糖体主要功能部位 P位--供位--肽酰基位 A位--受位--氨酰基位 T位--肽基转移酶 (T因子)位置。 G位--GTP酶 (移位酶)位置。 E位—即将离开的tRNA所暂时停留的位点。 核糖体的功能部位 核糖体结构特点 *由大小两个亚单位组成的小体。 *有左右贯通隧道---mRNA通道。 *大亚基有中央管----多肽链出口。 *核糖体上存在几个重要功能部位。 5.2 蛋白质的生物合成 中心法则图解 蛋白合成装置——核糖体复合物 5.2.1 遗传密码与密码子 遗传密码(genetic code) mRNA 三个核苷酸一组的特定排列所构成的一套aa的代码。由64个密码子组成 。 密码子(codon) ---mRNA分子上每3个相邻的核苷酸所组成的含特定信息的三联体。 遗传密码表 翻译过程所需模板——mRNA 遗传密码的特性 ① 方向性------ 读码方向:5’→3’ ② 简并性------ 除蛋aa 色aa,其余aa 均由2-6个 密码子编码。 ( 多个密码子决定同一 aa)。 同义密码子 ------前2碱基大多相同。 ③ 连续性 ------密码子间无间隔(连续排列 )。 ④ 摆动性-------密码与反密码结合有时不严格。 ⑤ 通用性 -------细菌到人类,遗传密码相同。 反密码环---反密码子 反密码子 —— 反密码环上的三联体。其第1 碱基(5’)与密码子的第3 碱基(3’)配对不严格(可摆动)。 5.2.2 tRNA与 反密码子 20种aa与 tRNA 的关系 密码子有简并性(2-6种编码一种aa)。 理论上, 如果一种密码子对应一种 tRNA, 那么一种aa可由2-6 种 tRNA转运。 密码子有摆动性 使得61种密码子不需61种tRNA来配合 原核细胞:30-40种 tRNA 真核细胞:50余种 tRNA 5.2.3 蛋白质合成的基本过程 1、AA 的活化与转运 2、肽链合成的起始 3、肽链的延伸 4、肽链的终止与释放 蛋白合成的过程 转录和翻译的偶联 蛋白合成基本步骤 1、aa活化与转运(氨酰tRNA 合成) ① aa、ATP、氨酰tRNA合成酶 → 复合体 ② 复合体 + t RNA → 氨酰 tRNA、 酶、AMP 2、肽链合成起始:3种 起始因子(IF)协助 30S起始复合物(小亚基-mRNA-f Met-tRNA) + 50S亚基 → 70S 核糖体复合物 合成的基本步骤 3、肽链的延伸:延伸因子(EF)。 入位→转肽 →移位 4、肽链终止与释放 :释放因子(RF) A位出现终止码,RF进入,激活肽基转移酶,水解肽链与 t RNA间的酯键。 肽链的延伸(入位、转肽) 肽链的延伸(第二循环) 肽链合成的终止 多聚核糖体同时工作 多聚核糖体在内质网上 核糖体合成蛋白的速度 真核细胞:每秒2个AA加到多肽链。 原核细胞:每秒20个AA加到多肽链 所以,合成一条完整肽链平均需要 20秒——几分钟。 5.2.4 蛋白合成后的加工修饰 刚合成的蛋白往往无活性(蛋白前体、酶原),需要进行加工、修饰才有活性。 eg: 胰岛素a合成: 胰岛素原(分
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