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2012年上半年惠州地区手足口病的实验室检测结果分析
【摘要】目的对惠州市2012年1-6月手足口病实验室检测结果进行分析了解手足口病病例肠道病毒的感染情况,为制定预防和控制肠道病毒感染策略提供依据。方法采集2012年1――6月我院送检的疑似手足口病患者的粪便、肛拭子、咽拭子和脑脊液等标本3480份,应用荧光RT-PCR技术检测样本中的肠道病毒(EV)、肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CA16)。结果共检出758份EV阳性标本,478份EV71阳性标本,138份CA16阳性标本,阳性率分别为65.69%,39.02%和12.53%,差异有统计学意义(P0.05);男女患者的感染率分别为63.25%和36.75%,差异有统计学意义(P0.05);0-4岁的儿童是手足口病的高发人群;4-6月份是2012年上半年手足口病发病高峰期,感染肠道病毒,EV71型和CA16型人数占所有肠道病毒,EV71型和CA16型感染者的84.43%(20.71%+36.15%+36.15%),91.42%(22.59%+40.17%+28.66%),76.53%(28.98%+27.54%+19.57%%);手足口病城区和乡镇的分布比例分别为41.70%和58.30%,差异有统计学意义(P0.05)。结论惠州地区2012上半年手足口病的病原以肠道病毒71型为主;0-4岁儿童是感染肠道病毒的高危人群;4-6月份是手足口病发病高峰期;手足口病的感染率乡镇高于城镇。
【关键词】手足口病;荧光RT-PCR;肠道病毒;肠道病毒71型;柯萨奇病毒A组16型
手足口病(Hand-foot-mouth disease,HFMD)是由肠道病毒(柯萨奇A16型、埃可病毒或肠道病毒71等)感染引起的,以出疹发热为主要特征的急性传染病[1]。近年来,EV71病毒的流行在亚太地区呈上升趋势。2008年4月,安徽省阜阳市爆发手足口病,导致多名患儿死亡[2],之后在中国大陆广泛传播。EV71感染者起病急,病程进展迅速,临床症状较重,容易并发脑膜炎,心肌炎及造成肺,肝等器官功能的损害,严重者可直接导致患者死亡。因此,手足口病的研究显得尤为重要。为了了解2012年惠州地区上半年手足口病的流行情况,我们收集了2012年上半年我院门诊及住院疑似手足口病患者的粪便、肛拭子、咽拭子、脑脊液、疱疹液等标本3480份,应用实时荧光PCR技术检测样本中的肠道病毒通用型、肠道病毒71型、柯萨奇病毒A组16型,以期为惠州地区制定预防和控制肠道病毒感染的策略提供依据。
1材料与方法
1.1标本的采集2012年1-6月期间,共采集3480份疑似手足口病患者的肛拭子、咽拭子、粪便、脑脊液等各类标本,放置-80℃冰箱冻存待检或立即检测。其中,男1049例,女625例,男女之比为1.68:1;年龄最小1个月,最大40岁,平均4.5岁。
1.2病毒RNA的提取采用达安基因公司的试剂盒提取。根据试剂盒说明书操作,取样本量为100μl,最终获得30μl病毒RNA,立即进行Real-time RT-PCR或置于-v 80℃保存备用。
1.3Real-time RT?PCR采用达安基因公司一步法荧光RT-PCR试剂盒,根据试剂盒说明书检测肠道病毒(EV),肠道病毒71型、柯萨奇病毒A组16型。
1.4统计学分析根据统计学软件SPSS软件包进行数据分析,求出x2和P值(P0.05有统计学意义)。
2结果
2.1肠道病毒检出情况收集肛拭子,咽拭子,脑脊液等各类标本3480份,其中检测EV标本1154份,检出EV阳性的标本758份,阳性率是65.69%;检测EV71标本共1225份,检出EV71阳性的标本478份,阳性率是39.02%;检测CA16标本共1101份,检出CA16阳性的标本138份,阳性率是12.53%。两两比较显示,EV71阳性率明显大于CA16阳性率,差异有统计学意义(P0.05),见表1。
3讨论
手足口病是全球性传染病,已引起了全世界的普遍关注。早期发现的手足口病的病原体主要为CA16型。手足口病与EV71感染有关的报道始于20世纪70年代初,1974年美国首次确认EV71[3],此后EV71感染与CoxA16感染交替出现,成为手足口病的主要病原体之一。
本研究中,3480份各类标本中,检出EV阳性的标本758份,阳性率是65.69%;检出EV71阳性的标本478份,阳性率是39.02%;检出CA16阳性的标本138份,阳性率是12.53%。这表明2012年上半年惠州地区手足口病流行的病原体以EV71为优势病毒株,并同时存在CA16和其他肠道病毒流行。这与李亮等人的研究结果相一致[4]。通常情况下,CA1
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