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Glu产生菌主要生理生化特性 需氧,生物素缺陷型bio-,有乙醛酸循环,羧化酶活性强(bio作为辅酶) 柠檬酸、异柠檬酸、谷氨酸脱氢酶活性高,Glu合成中存在正常反馈阻遏和反馈抑制。菌体细胞膜通透性差,不利于Glu胞外分泌。 第五节 Lys代谢控制发酵 生产菌种 谷氨酸棒杆菌(C.glutamicum) 黄色短杆菌(B. flavum) 乳糖发酵短杆菌(B.lactofermentum) 2、谷氨酸棒杆菌、黄色短杆菌Lys合成途径及正常调控机制 Asp三分支途径优先合成Met,后合成Thr、Ile,最后合成Lys Thr和Lys对Asp激酶有协同反馈抑制 Thr对Hse脱氢酶有反馈抑制 Ile对Thr脱氢酶有反馈抑制 Met对O-琥珀酰高丝氨酸合成酶有反馈阻遏 3. Lys 代谢控制发酵 菌种的遗传改造 (1)切断支路代谢——Hse营养缺陷型(Hse-)菌株筛选 选育Hse脱氢酶缺失的Hse-菌株,使代谢流向Lys合成,控制Hse添加量,既满足菌体对Met、Thr和Ile生长需要又不形Thr和Lys对Asp激酶的协同反馈抑制,积累Lys (2)用Hse-菌株选育解除Lys反馈抑制突变株 (3) Hse脱氢酶渗漏缺陷型突变株 日本椎尾等人 黄色短杆菌 突变株 (4) Lys 生产菌种遗传标记及Lys产量 谷氨酸棒杆菌 Hse- K.Nakyama 13g/L Hse-AECR 中山清(日本) 42g/L 黄色短杆菌 Hse-AECRCSIFps I.shiio 51g/L (CSI:柠檬酸合成酶抑制;Fps:氟代丙酮酸敏感) 黄色短杆菌 AIII Hse-AECr 徐所维 50-55g/L 钝齿棒杆菌 pI-3-2 Hse-AECr 陈琦 50g/L (5) 乳糖发酵短杆菌Lys代谢控制发酵 Lys合成与调控机制基本同于谷氨酸棒杆菌、黄色短杆菌。 特殊调控:代谢互锁调控机制 互锁调节:Lys合成受其它氨基酸合成途径产物反馈调节 Lys生产菌种遗传标记和产量: Hse-AECRLeu- 110g/L (加Hse,限量加Leu,免除Leu对DDP合成酶反馈阻遏互锁调节) Hse-AECRLeu-α-TARAla- 110g/L (加Hse、Leu,限量加Ala,α-TA是Leu结构类似物) 3. Lys 代谢控制发酵 菌种的遗传改造 (1)切断支路代谢——Hse营养缺陷型(Hse-)菌株筛选 选育Hse脱氢酶缺失的Hse-菌株,使代谢流向Lys合成,控制Hse添加量,既满足菌体对Met、Thr和Ile生长需要又不形Thr和Lys对Asp激酶的协同反馈抑制,积累Lys (2)用Hse-菌株选育解除Lys反馈抑制突变株 (3) Hse脱氢酶渗漏缺陷型突变株 日本椎尾等人 黄色短杆菌 突变株 (4) Lys 生产菌种遗传标记及Lys产量 谷氨酸棒杆菌 Hse- K.Nakyama 13g/L Hse-AECR 中山清(日本) 42g/L 黄色短杆菌 Hse-AECRCSIFps I.shiio 51g/L (CSI:柠檬酸合成酶抑制;Fps:氟代丙酮酸敏感) 黄色短杆菌 AIII Hse-AECr 徐所维 50-55g/L 钝齿棒杆菌 pI-3-2 Hse-AECr 陈琦 50g/L (5) 乳糖发酵短杆菌Lys代谢控制发酵 Lys合成与调控机制基本同于谷氨酸棒杆菌、黄色短杆菌。
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