送检病料的注意事项课件.ppt

送检病料的注意事项 上海农场生产技术服务中心 吴中彬 一、送检病料的选择 1、采集发病初期，临床症状明显的，未用抗生素（1周内）治疗的发病猪只,采病料的时间应在病猪死后的数小时内进行（冬季6小时内、夏季4小时内）。 2、怀疑某种疾病时，应采取该病常侵害的部位。 3、提不出怀疑对象时，可以将整个病猪送检。 4、败血性传染病，如猪瘟、败血性链球菌病，可以采取心、肝、脾、肺、肾、淋巴结以及胃肠等组织。 一、送检病料的选择 5、专嗜性传染病或侵害某种器官为主的传染病，则采取该病侵害的主要器官组织，如猪大肠杆菌病采取肠管以及肠内容物，有神经症状的传染病采取脑、脊髓等。 6、检查疫苗免疫效果时，则需采取血液，待凝固析出血清后用于检测。 二、病料采集的注意事项 1、解剖前检查：凡发现病猪急性死亡时，切不可随便解剖。未解剖前，必须由末梢血管采血（或局部采血）作涂片，检查是否患有炭疽杆菌。操作时应特别注意，勿使血液污染他处，以防传播和对人体的伤害。当确定不是炭疽时，方可解剖。 二、病料采集的注意事项 2、采集器械的消毒：采集用的刀柄、刀片、剪刀、镊子等用具可以煮沸30分钟，然后用酒精棉球擦拭，并在火焰上烧一下。器皿在高压灭菌器内或干燥箱内灭菌；软木塞或橡皮塞置于0.5%石炭酸溶液中煮沸10分钟。载玻片应在1%-2%的碳酸氢钠溶液中煮沸10-15分钟，水洗后再用清洁纱布擦干，将其保存于酒精中。注射器和针头放于清水中煮沸30分钟即可。 二、病料采集的注意事项 3、病料采集人员需带好手套，穿上防护服和雨靴，病料采集好后要注意场所和人员（尤其是参与病料采集的饲养员）的消毒，防止人为的扩散病原。 4、每个猪场最好有固定的采集病料的地点，以便消毒和隔离。 三、病料的保存 采取病料后要及时送实验室检测，如病料不能不能立即进行检测，或须送往外地检验时，应加入适量的保存剂，使病料尽量保持新鲜状态，以便得出正确的结果。 二、病料的保存 （一）细菌检测材料的保存 将采取的组织块，保存于饱和盐水或30%甘油缓冲液中，容器加塞封固。 1、饱和盐水配制 蒸馏水100毫升，加入氯化钠38-39克，充分搅拌溶解后，用数层纱布滤过，高压灭菌后备用。 二、病料的保存 2、30%甘油缓冲溶液的配制 纯净甘油30毫升，氯化钠0.5克， 碱性磷酸钠1克，蒸馏水加至100毫升，混合后高压灭菌备用。 （二）病毒检验材料的保存 将采取的组织块保存于50%甘油生理盐水或鸡蛋生理盐水中，容器加塞封固。 二、病料的保存 1、50%甘油生理盐水的配制 中性甘油500毫升，氯化钠8.5克，蒸馏水50毫升，混合后分装，高压灭菌后备用。 2、鸡蛋生理盐水的配制 先将新鲜鸡蛋的表面用碘酒消毒，然后打开，将内容物倾入灭菌的容器内，按全蛋9份加入灭菌生理盐水1份，摇匀后用纱布滤过，然后加热至56 ℃ -58℃，持续30分钟，第二日和第三日各按上法加热1次，冷却后即可使用。 二、病料的保存 （三）病理组织学检验材料的保存 将采取的组织块放入10%福尔马林溶液或95%酒精中固定，固定液的用量须为标本体积的10倍以上。如用10%福尔马林固定，应在24小时后换新鲜溶液1次。严寒季节为防组织块冻结，在送检时可将上述固定好的组织块取出，保存于甘油和10%福尔马林等量混合液中。 二、病料的保存 （四）血清学检测样品的保存 用于血清学检测的样品一般情况下冷藏条件下保存就可以，如有特殊需要，可以将同一血清分装在几个EP管中，除需要检查的一份，其余的冷冻保存（-15℃）。 三、病料的送检 （一）病料的记录和送检单 1、装病料的容器上要有编号，并详细说明送检样品的情况，附有送检单。 2、送检病料的记录包括：病猪的年龄、性别、发病日期、症状、死亡时间和取材时间，以及送检病猪的免疫情况和治疗情况。 三、病料的送检 （二）病料的包装和运输 一般微生物检测病料怕热，需用泡沫箱装上冰块保存，病理检验材料怕热。 对于送检的血清样品在送检途中要防止剧烈震荡，避免引起溶血，影响检测结果。 病料采集装箱后，要尽快托料车带到动保中心，送外地检测的可以派专人送检。 四、一些常规病料的采集事项 1、全血的采集：在一次性采血器内先吸入灭菌的5%柠檬酸钠1ml，再采血5-10ml，混合后放在试管架上， 2、血清的采取 (1)、用一次性采血器采集2-5ml血液，将采血器的活塞微微拔出一些，使针筒内留有部分空气，然后将一次性采血器摆成斜面，静置于室温或温箱中1-2小时，待血液凝固后放置冰箱（4℃）或冷暗处，析出的血清装入EP管中，编号用于检测。 四、一些常规病