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CH 3 酶的发酵生产 目前工业酶制剂的主要来源包括:通过微生物发酵生产和从动植物细胞中提取两个途径。 [1] 动物组织/细胞; [2] 植物组织/细胞; [3] 微生物发酵; [4] 动植物细胞发酵; 尽管生物技术已取得突破性进展,目前酶制剂生产还主要以微生物为主。 CH3.1 酶制剂生产的微生物 无论是微生物还是动植物细胞,用于酶的发酵生产,必需具备以下几个条件: ① 必需具有优良的产酶性状;…… ② 细胞易于培养和生长发育;…… ③ 细胞的产酶性能必需稳定;…… ④ 最好选用产胞外酶的细胞;…… ⑤ 细胞必需无毒无害;…………… 尽管生物技术已取得突破性进展,目前酶制剂生产还主要以微生物为主。 CH3.2发酵原料和辅助性原料 1碳氮源 利用微生物生产酶制剂的主要原料是碳源和氮源,此外还有无机盐、生长因子和产酶促进剂。这些发酵原料与微生物的培养基原料类似。 考虑发酵培养基的原料时: [1] 有利于发酵微生物的生长繁殖; [2] 有利于酶的产生或不影响酶的产生; [3] 原料成本; 目前所利用的有机碳源,主要是来源于农副产品原料,用的最多的有甘薯干、玉米、麸皮、米糠等等; 有机氮源主要有油料作物的籽实在榨油后的副产品,如豆饼、花生饼、菜籽饼、棉籽饼等; 常用的无机氮源有 硫酸铵、硝酸铵、磷酸氢二铵、尿素等。 CH3.3 发酵方法 1. 固态发酵法 固态发酵法又称为麸曲培养法,该法是利用麸皮或米糠为主要原料,添加其它辅料,制成固体培养基,进行发酵的一种方法。 CH3.3 发酵方法 2. 液态发酵法 液态发酵方法,是利用液体培养基进行微生物生长繁殖和产酶方法。 其特点是: ①液态发酵的自动化控制程度高,节省人力投入; ②液态发酵生产的酶制剂易提取制备。 ③液态发酵适合于大规模生产; ④液态发酵的投资要求高,要求生产的技术条件高。 目前液态发酵普遍采用的是‘液态深层通气发酵法’。 CH3.4 发酵产酶的影响因素 1 发酵温度: [1] 微生物生长温度: [2] 微生物产酶温度: [3] 在刚接种的初期,主要是通过供热和保温来保持发酵液温度的恒定; [4] 大量微生物生长起来以后,发酵液的热量来源主要有细胞的代谢热、通气带入的热量和发酵液机械搅拌产生的机械热。这个时期控制发酵液的温度主要是进行降温冷却。 * * 2 产酶促进剂 在发酵培养基中添加某些少量成分,能显著提高酶的产量,这类添加成分即为产酶促进剂。下表是表面活性剂吐温80(0.1%)对多种酶产生的影响: ────────────────────────────── 酶 来源 酶产量增加倍数 ────────────────────────────── 纤维素酶 多种霉菌 20 转化酶 多种霉菌 16 β-1,3葡聚糖酶 多种霉菌 10 β-葡萄糖甘酶 多种霉菌 8 木聚糖酶 多种霉菌 4 淀粉酶 多种霉菌 4 酯酶 多种霉菌 6 ───────────────────────── ──── 固态发酵法的特点是: ① 本法对设备条件要求简单,适合投入力量不足的乡镇企业生产; ② 此法利用固体培养基,由于麸皮、米糠等的通气性好,尤其是对于好氧性微生物的发酵,通气对产酶的影响很大; ③ 固态发酵的产酶效率高,一般情况下,每克发酵基质的产酶量是液态发酵每毫升发酵液的10倍; ④
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