疑难生物检材法医 DNA检验的现状与进展.docVIP

疑难生物检材法医 DNA检验的现状与进展 　　【摘 要】疑难生物检材在法医DNA检验中具有重要价值。本文从常见的疑难生物检材出发，对不同检材的检验现状和研究进展进行了分析，并就处理对策和注意事项进行了总结，期望为疑难生物检材的鉴定工作提供有益参考。 　　【关键词】疑难生物检材；法医鉴定；DNA 　　【中图分类号】R446.1 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2012）11-0647-01 　　在当前DNA检验中，PCR-STR复合扩增技术是常用的方法。但是，随着犯罪分子作案手段的不断高明，在检材中，往往涉及面罩、绳索、混合精斑等疑难生物检材[1]。如何对这些疑难生物检材进行法医学检验，对于案件的侦破具有重要意义。从目前的法医实践来看，疑难生物检材可以分为微量检材、降解生物检材和混合生物检材。本文将根据不同的检材对目前的有关研究现状进行评述与总结。 　　1 微量检材 　　1.1 微量检材的来源 　　随着现代讯息和传播技术的发展，价值犯罪分子的反侦破意识不断增强，很多犯罪分子在案发后，会破坏传统意义的各种作案证据。在这样的背景下，微量检材成为侦破的重要线索。所谓微量检材，就是DNA 含量少于 100 pg，相当于 15 个双倍体或 30 个单倍体细胞的生物样本。从目前的实践来看，微量检材的主要来源包括如下几方面：犯罪分子的衣着或穿戴物，比如帽子、头套甚至内衣裤等；犯罪分子作案使用的作案工具，主要是相对细小的把手或者手柄等；犯罪分子可能会接触的一些生活用具，主要是一些吃剩的食物以及未及时清理的其他物品；此外，一些可能会含有犯罪分子DNA信息但容易为人忽视的物件，比如烟头、拭子、犯罪分子遗留的指甲等。 　　1.2 微量检材的处理方法 　　虽然微量检材所遗留的信息较少，但是通过一定的处理，还是可以提取有效的信息。Tsukada K， Takayanagi K， Asamura H等人[2]曾报道，通过增加PCR的循环次数可以提高扩增效率。而Gill P， Whitaker J， Flaxman C[3]等人提出扩增后产物纯化技术。经过实验证实，可以有效的增强荧光检测信号强度。此外，全基因组扩增（whole genome amplification，WGA）技术也是一种可靠的选择。该技术可以有效增加样本DNA的总量，利于扩增与测序。不过，该方法的使用成本较高，在基层进行推广并不具有普遍意义。此外，还可以使用激光捕获显微切割技术、巢式PCR技术、SNP技术和迷你PCR检测体系。虽然这些技术在操作方法上有所差异，但是其主要的思路都是通过有关技术辅助，提高扩增效率，从而获得更多的信息。 　　2 降解生物检材 　　2.1 影响降解生物检材降解的因素 　　随着犯罪分子作案手段日趋残忍，降解生物检材在法医鉴定中具有重要的意义[4]。但是，降解生物检材容易受到各种环境的干扰，从而给鉴定带来困难。从外部环境来看，如下几个因素对降解生物检材的降解具有重要影响。第一，温度。从化学降解的角度来分析，如果温度提高20℃，生物大分子的降解速度将会提高20倍左右。反之，如果温度降低，则会抑制生物降解速度。第二，湿度。一般而言，湿度在60%-70%，生物降解的速度适中。如果过湿，则可能加快降解速度。如果湿度不够，则会导致生物体缺少，破坏基本的生物分子结构。第三，微生物、不适宜的酸碱环境等对降解也有极强的影响。如果生物检材降解，将会导致DNA片段分解，在检验中，出现基因信息的缺失，不利于侦破工作。 　　2.2 降解生物检材处理对策 　　可以适当采用其他的检验系统完成样本的判断。比如要将样本扩增到200bp存有困难，这时就不应该强调STR的分性敏感，以免造成分型异常。另外，还可以考虑适当的改变部分实验条件。比如增加 Taq 酶量或DNA模板量，或者增加循环次数，以获得较好的效果。不过，在使用中。要尽量避免实验条件的改变，出现影响精度的情况。Mini―STR技术也是值得运用的一种技术[6]。通过重新设计引物，使其尽可能靠近STR 核心重复序列的侧翼序列，将 PCR 扩增产物片段长度缩短至100 bp 左右，可以极大地提高DNA的检出率。还可以考虑使用SNP 多态性基因座进行分型，这样是目前法医学中的一个热点研究领域。除了上述方法外，也可以使用mtDNA，不过该方法的成本较高，而且只能起到排除的作用，难以用于认定，目前在基层推广还具有一定难度[7]。 　　3 混合生物样本检测 　　3.1 混合生物样本适用范围 　　混合生物样本来自2个以上个体。由于个体在样本中所占的比例不同，因此不同样本的检出难易程度并不一致。通常的混合样本见于强奸案或轮奸案。经过女性成分的消化后，可以得到较为单一的样本。从实践来看，对这类样本的分析较为成熟。不过，在对男性成分较少