血管基质成分提升面部脂肪移植存活率的临床观察.docVIP

血管基质成分提升面部脂肪移植存活率的临床观察 　　[摘要]目的：探讨间质血管基质成分（stromal vascular fraction，SVF）在颜面部微整形中的应用，降低移植的脂肪颗粒被吸收率。方法：笔者选择24例进行面部精雕脂肪填充的患者，于下腹部采用肿胀吸脂术获得自体颗粒脂肪，通过静置，纯化后，加自身血管基质细胞。混合液采用多点、多层、多部位的注射方法，精雕塑型颜面部。结果：术后随访12～24个月，22例效果满意，面部两侧基本达到对称，脂肪颗粒基本上没有被吸收，不必进行第二次脂肪填充手术。而46例对照组单纯进行脂肪填充的患者均有不同程度的脂肪被吸收，其中有34例需要进行第二次脂肪填充。结论：血管基质细胞可以提高自体颗粒脂肪的存活率，面部脂肪填充可以一次成形，减少手术次数。 　　[关键词]血管基质层细胞（SVF）；脂肪颗粒移植；面部微整形。 　　[中图分类号]R622 [文献标识码]A [文章编号]1008-6455（2014）04-0267-03 　　自体脂肪组织作为一种理想软组织填充材料，在整形与美容外科领域应用越来越广泛。其优点是植入自体脂肪组织没有排异，与周围组织质地相同，外观和手感良好。但由于脂肪细胞的耐缺血能力较差，失去了原有微血管结构的脂肪组织颗粒移植物，在与受区重新建立血运以前，常因局部血供不足而发生移植的脂肪细胞坏死、吸收，形成硬结、囊肿等。吸收率达到20%～90%，因此临床上往往需要重复脂肪移植注射2～3次才能达到满意的效果，给患者带来了巨大的痛苦和不便。本研究观察自体基质血管成分（stromal vascular fraction cells，SVF）对提高移植脂肪颗粒（adiposegranule，AG）成活率的作用，以大幅度提升面部微整形的临床效果。 　　1 临床资料 　　本临床组共24例，女性18，男性6例，年龄38～53岁。均愿意进行面部精雕塑形。其中有的患者颜面部各个部位均过度消瘦，感觉就像80岁一样，颜面部皮肤干燥甚至干裂，皱纹显著，皮肤表面触摸时感觉皮肤很松弛，非常自卑，从不敢出席各种社交活动，这些患者都非常羡慕别人有滋润的皮肤，但都拒绝多次面部手术，担心移植的脂肪被吸收，害怕进行多次填充手术。对照组是进行单纯脂肪移植的患者，共46例，女性36例，男性10例， 年龄32～60岁。 　　2 手术方法 　　2.1 脂肪颗粒的制备：采用脂肪抽吸的方法，肿胀液配方：2%利多卡因注射液25ml+0.9%生理盐水1000ml肾上腺素注射液1ml+8万单位庆大霉素2ml，注射肿胀液至局部发硬发白后，采用普通的注射器抽吸颗粒脂肪。用20ml注射器连接16～18号针头，将针头插入抽吸部位后回抽针芯，使针筒内形成负压，并保持负压，采用扇形往复抽吸技术。收集抽取的脂肪约200～250ml，注射前将收集的颗粒脂肪过滤筛选，排去肿胀液，再注入生理盐水，反复冲洗3～4次，充分去除肿胀液、血液、破碎的脂肪及纤维组织碎块，直至所供颗粒脂肪呈均匀黄色的纯净颗粒脂肪。 　　2.2 SVF的制备 　　2.2.1主要试剂：DMED 低糖培养基（美国GIBCO公司）；胚胎牛血清，磷酸盐缓冲液（PBS），牛血清白蛋白，Ⅰ型胶原酶，胰蛋白酶（美国 Sigma公司），25cm的培养瓶。 　　2.2.2 脂肪组织的消化：剪取脂肪组织约500mg，剔除肉眼可见的血管和纤维组织，PBS冲洗3次，剪切成约1cm×1cm×1cm的组织块，移入酶消化液4ml中，内含1% 和0.1% I型胶原酶，37℃消化60min，消化期间每间隔5min上下震荡1次，加入含15% 胎牛血清的DMEM-F12培养基终止消化。 　　2.2.3 SVF的分离：75UM网筛过滤组织消化液，去除未消化残余组织，将滤液移入新的10ml离心管， 1800r/min离心10min，可见离心管内液体分成4层，先吸除最上面的脂滴和第二层的乳状的成熟脂肪滴，和第三层的上清液，留下底层的沉淀物SVF，加入生理盐水3ml，吹打重悬，计数。 　　2.2.4 SVF和脂肪颗粒混合液的制备：将吸脂所得新鲜脂肪颗粒约200ml倒入3个25cm的培养瓶中，将上述SVF液3ml加入200ml的脂肪颗粒中，充分混合，制成混合液。将培养瓶安置入37℃的无菌培养箱中培养2h，待用。 　　2.3 SVF和脂肪颗粒混合液移植的方法：注射时可用30cm长的圆头16～18号针头，自凹陷的一端沿长轴穿刺全凹陷的另一端，边退针边缓慢注射，注射时脂肪SVF混合液应被间断注射成扇形的线状柱体。避免注射较大的团块状，以防血运不佳，注意凹陷处的皮肤逐渐丰满起来，该处皮肤由红变白，此时即为理想的注射量。可边注射边用手轻轻的推匀，整体注射完毕后，用滚轮轻推，再用平纱轻轻揉表面，使其尽可能平坦