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生化生产工艺学 第三章 培养基设计和淀粉制糖工艺 葡萄糖：是最常用的单糖 糖蜜：甜菜废糖蜜、甘蔗废糖蜜，内含生物素 淀粉：玉米淀粉、马铃薯淀粉、小麦淀粉等 易被菌体迅速利用的糖类对许多产物合成有调节作用，应控制其浓度，或与多糖组成混合碳源，有利于产物的形成。 铁 是菌体的细胞色素，细胞色素氧化酶和过氧化物酶的组成元素，是菌体生命活动的必需元素之一 镁，锌，钴 是某些酶的辅酶 钾 影响细胞膜的通透性 钠 具有维持细胞的渗透压的功能 钙 调节细胞的透性的作用，调节培养液中磷酸盐的含量 构成微生物细胞和代谢产物中氮素来源的营养物质，可补充碳源，是发酵的主要原料之一。（牛肉膏蛋白胨培养基） 分无机氮源和有机氮源两大类 1、无机氮源 种类：氨盐、硝酸盐和氨水 特点：微生物对它们的吸收快，所以也称之谓迅速利用的氮源。但无机氮源的迅速利用常会引起pH的变化如： (NH4)2SO4 → 2NH3 + 2H2SO4 NaNO3 + 4H2 → NH3 + 2H2O + NaOH 第二节 微生物的营养物质和营养类型 微生物的营养物质和营养类型 一、微生物的营养物质 3）氮源物质 无机氮源被菌体作为氮源利用后，培养液中就留下了酸性或碱性物质，这种经微生物生理作用（代谢）后能形成酸性物质的无机氮源叫生理酸性物质，如硫酸胺，若菌体代谢后能产生碱性物质的则此种无机氮源称为生理碱性物质，如硝酸钠。正确使用生理酸碱性物质，对稳定和调节发酵过程的pH有积极作用。 所以选择合适的无机氮源有两层意义： 满足菌体生长 稳定和调节发酵过程中的pH 3）氮源物质 毛霉产蛋白酶的研究 陈涛，中国酿造，2004 初始pH的影响: pH偏酸比较好，中性蛋白酶影响大 无机氮源的影响： 硫酸铵硝酸铵硝酸钠尿素 无机氮源的特点 1、成分单一，质量较稳定 2、易被菌体吸收利用 　　利用铵盐和硝酸盐能力强，铵离子被细胞吸收后还可直接利用，因而硫酸铵等铵盐被称为速效氮源。 　　铵离子对多数产物合成有调节作用，应控制加入的浓度。 3、改变培养液的pH值： 　生理酸性物质：代谢后能产生酸性物质的营养成分，如硫酸铵。 　生理碱性物质：代谢后能产生碱性物质的营养成分，如硝酸钠、乙酸钠等。 2、有机氮源 来源：工业上常用的有机氮源都是一些廉价的原料，花生饼 粉、黄豆饼粉、棉子饼粉、玉米浆、玉米蛋白粉、蛋 白胨、酵母粉、鱼粉、蚕蛹粉、尿素、废菌丝体和酒 糟。 成分复杂：除提供氮源外，有些有机氮源还提供大量的无机 盐及生长因子。 例 玉米浆： ①可溶性蛋白、生长因子（生物素）、苯乙酸 ②较多的乳酸 ③硫、磷、微量元素等 有机氮源成分复杂可以从多个方面对发酵过程进行影响，而另一方面有机氮源的来源具有不稳定性，所以在有机氮源选取时和使用过程中，必须考虑原料的波动对发酵的影响。 氮源使用的一些相关问题： 有机氮源和无机氮源应当混合使用 早期：容易利用易同化的氮源—无机氮源 中期：菌体的代谢酶系已形成、则利用蛋白质 有些产物会受氮源的诱导和阻遏 例： 蛋白酶的生产 有机氮源选取时也要考虑微生物的同化能力 开发效果好、有针对性的有机氮源仍然是令人感兴趣 的课题 有机氮源的特点 1、 成分比较复杂 2、被菌体利用的速度不同 　　玉米浆中氮源物质以蛋白质降解产物形式存在，易吸收和利用，为速效氮源。 　　黄豆饼和花生饼中氮原物质以大分子蛋白质形式存在，需进一步降解才能吸收利用，为迟效氮源。 3、微生物对氨基酸的利用有选择性 　　可直接利用，用于合成蛋白质和其他物质 4、是引起发酵水平波动的主要因素 　　产地不同，加工方法不同，质量不稳定，常引起发酵水平波动 工业上主要作为氮源的基质 （1）玉米浆：是由玉米生产淀粉或糖时得到的一种副产品。大约含4％的氮，含有多种氨基酸，糖含量约为3.5％，乳酸含量约为12％； （2）大豆饼：是大豆榨油后的残渣，含氮约8～12％，含碳水化合物约30％，另外还含有多种矿物质和少量的油。 （3）鱼粉：是鱼类下脚料加工而成的粉状物； 工业上主要作为氮源的基质 （4）棉籽饼粉：由棉籽榨油后制成的粉末，含约56％的蛋白质，24％的碳水化合物，5％的油和5％灰分； （5）酵母浸出物：由酵母浸出而成，主要用于微生物的前培养。 （6）蛋白质水解物：如牛肉膏、蛋白胨等，价格较贵主要用于斜面培养基。 （7）发酵残液