课件食品中有害物质的检测 (考试复习)- 副本.ppt

分布： 呕吐毒素一般在大麦、小麦、玉米、燕麦中含有较高的浓度，在黑麦、高粱、大米中的浓度较低。 6）“即用胶”系统 据培养基不同分别用于菌落总数，大肠菌数，大肠埃希菌计数和霉菌，酵母菌计数，以及弯曲杆菌的计数。微生物数量的检测法利用培养的菌液可在波长365nm处产生蓝色荧光 （c）酸价影响因素 油脂在贮藏期间，由于水分、温度、光线、脂肪酶等因素的作用，被分解为游离脂肪酸。于油中而使酸价增大，贮藏稳定性降低。 酸价越小，说明油脂质量越好，新鲜度和精炼程度越好。 DNM-9602G酶标分析仪 DNM-9602 标配酶标分析仪 DNM-9602A酶标分析仪 几种酶标分析仪 用来半定量测定各种食品中的黄曲霉毒素B1，B2，G1及G2的总量 原理：样品提取液中的黄曲霉毒素被微柱管内硅镁型吸附剂吸附后，在波长365nm下显示蓝紫色的荧光环。 荧光强度与黄曲霉毒素在一定浓度范围内成正比。 灵敏度：5-10ug/ml 微柱筛选法 免疫亲和柱净化-荧光计快速测定法 免疫亲和色谱法净化-HPLC法 适用范围：测定牛奶，奶粉及低脂牛奶， 脱脂牛奶之中的黄曲霉毒素M1的含量 检测限：奶粉—0.08ug/kg 牛奶—0.008ug/kg 黄曲霉毒素M1的快速检测技术 * 赭曲霉毒素A的测定方法 直接竞争性酶联免疫吸附测定法 间接竞争性酶联免疫吸附测定法 * 伏马毒素的快速分析技术 呕吐毒素快速分析技术 酶联免疫吸附测定法 T-2毒素的快速分析技术 酶联免疫吸附测定法 免疫亲和柱-荧光分光光度法 其他毒素的测定方法 第二节 食品中有毒微生物的测定 食品中有毒微生物的测定 食品中微生物的数量，在食品卫生学中是作为判定食品微生物污染程度的标志 1）旋转平皿计数方法 2）疏水性栅格滤膜法或等格法 3）皿膜系统 4）酶底物计数 5）直接外荧光滤过技术 6）“即用胶”系统 1）旋转平皿计数方法 用液态样品螺旋式并不断稀释地接种到一个旋转的平皿中 2）疏水性栅格滤膜法或等格法（HGMF） 用HGMF过滤样品，然后把疏水性栅格滤膜放置在相应的固体培养基培养，再观察细菌，酵母菌或霉菌菌落。 用于菌落总数，大肠菌属，粪大肠菌群，大肠埃希菌及霉菌，酵母计数。 3）皿膜系统 原理： 在一双层膜系统内还有干燥的营养物质和冷水可溶的胶体物质，以每系统1ml的加样量将样品直接加到基础膜中间，盖上含有凝胶剂和TTC的覆盖膜，培养后细菌在双层膜之间生长即可直接计数。 用于菌落总数，大肠菌群，大肠埃希菌，霉菌，酵母和金黄色葡萄球菌计数 4）酶底物技术 用于大肠菌群和大肠埃希菌计数 原理：大肠菌群特有的β-D-半乳糖苷酶系统能分解吡喃半乳糖为某中间产物，该物经氧化生成水不溶性蓝色二聚物。 大肠埃希菌特有β-葡萄糖苷酶能分解4-甲基伞形酮葡萄糖苷酸为葡萄糖苷和甲基伞形酮，在366nm下产生荧光 5）直接外荧光滤过技术（DEFT） 用一特殊膜滤过样品，经吖啶橙染色后，用紫外光显微观察 活细胞呈橙色荧光，死细胞呈绿色荧光 7）用于估计微生物数量的新方法 阻抗法：用电阻抗作为媒介，以监测微生物代谢活性为基础的一种快速检测方法 Malthus:大分子分解成带电荷的小分子 电导度产生改变的时间与初始菌数的反比关系 * 枯草芽孢杆菌 白色念珠菌 检出时间：72h； 检出灵敏度：10-11，1cfu 检出时间：120h(仍澄清)； 检出灵敏度：较难判断 检出时间：15h； 检出灵敏度：10-10，1cfu 检出时间：72h； 检出灵敏度：10-8，10cfu ATP生物发光技术（BL）： 所有的生物都含有ATP，当荧光酶系统与ATP接触时就会发光。利用产生于生物体内的化学发光现象而建立起来的一种快速检测微生物数量方法是 7）用于估计微生物数量的新方法 * 限量要求 * * * * 真菌毒素的检测步骤 * 取 样 * 提取 提取剂：乙腈-水 或甲醇-水 提取方式：振荡或均质 * 净 化 液液萃取 固相萃取净化 多功能柱净化 免疫亲和净化 * 分 析 定量： 高效液相色谱法 LC-MS/GC-MS 半定量 薄层色谱 酶联免疫法 * 一 亲和色谱(affinity chromatography，AFC) 亲和色谱广泛用于酶、抗体、核酸、激素等生物大分子以及细胞、细胞器、病毒等物质的分离与纯化。 特别是对分离含量极少而又不稳定的活性物质最有效，经一步亲和色谱即可纯化几百至几千倍。 亲和色谱的优点 ①选择性高、特异性极强 ②操作条件温和 ③回