高中生物 《基因工程和细胞工程》课件 新人教版选修3.ppt

2010年省生物教学学会年会报告 基因工程和细胞工程 基因工程的基本操作程序 基因文库(gene library)概念 又称DNA文库，是指某个生物的基因组DNA或cDNA片段与适当的载体在体外重组后，转化宿主细胞，通过筛选后得到大量的阳性菌落(或噬菌体)，所有菌落或噬菌体的集合即为该生物的基因文库。 基因文库由外源DNA片段、载体和宿主细胞组成。 基因组文库(Genomic library) 将某种生物体的全部基因组DNA用限制性内切酶或机械力量切割成一定长度范围的DNA片段，再与合适的载体在体外重组并转化相应的宿主细胞获得的所有阳性菌落。该文库以DNA片段的形式贮存着该生物全部基因组的信息，可用于分离目的基因和保存某种生物的全部基因。 cDNA文库 (cDNA library) 提取某生物组织或发育时期的总mRNA，经反转录产生的cDNA (complementary DNA，互补DNA)片段分别与克隆载体重组，储存于受体菌中，该群体就称该生物基因组的cDNA文库。 构建基因文库的基本程序 1)提取研究对象基因组DNA，制备合适大小的DNA片段，或提取组织或器官的mRNA并反转录成cDNA； 2) DNA片段或cDNA片段与经特殊处理的载体连接形成重组DNA； 3)重组DNA转化宿主细胞或体外包装后侵染受体菌； 4)阳性重组菌落或噬菌斑的筛选。