第一节 酶定向进化的特点 一、适应面广 二、目的性强 三、效果显著 第二节 酶基因的随机突变 一、易错PCR技术 二、DNA重排技术 三、基因家族重排技术 第三节 酶突变基因的定向选择 一、突变基因文库的构建 (一)构建基因文库的质量要求 文库的包容性 文库的完整性 (二)构建突变基因文库的主要过程 载体的选择 基因重组 组装突变基因文库 二、突变基因的筛选 (一)定向选择环境条件的设定 (二)高通量筛选技术 平板筛选法 荧光筛选法 噬菌体表面展示法 酵母细胞表面展示法 第四节 酶定向进化的应用 一、提高酶的催化效率 二、增加酶的稳定性 三、改变酶的底物特异性 * 近代有机相酶催化研究再次起飞的里程碑 Zaks,A.and Kilbanov,A.M(1984),Science224,1249-1251 ZoKs,A. and Kilbanov,A.M.(1985),Proc.Natl,Acad,Sci.u.s.a.82,3192-3196 * 1)含水率较高,最大可达30%-45%。水分有利于降低油的黏度、提高稳定性,但降低了油的热值; 2)pH值低,故贮存装置最好是抗酸腐蚀的材料; 3)密度比水大,与水的比值约为1.2; 4)具有“老化”倾向,加热不宜超过80℃,宜避光、避免与空气接触保存; 5)润滑性能好。 6)优良的环保特性:硫含量低
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