(3)电泳:蛋白质等生物大分子都具有可解离的基团,在一定的pH下会带上正电或负电。在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。故电泳可利用待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身大小、形状的不同,使带电分子产生不同的迁移速度,从而实现样品中各种分子的分离。 2.实验操作程序 (1)样品处理 ①红细胞的洗涤:除去血浆蛋白等杂质,有利于后续步骤的分离纯化; ②血红蛋白的释放:使红细胞涨破,血红蛋白释放出来; ③分离血红蛋白溶液:经过离心使血红蛋白和其他杂质分离开来,便于下一步对血红蛋白的纯化。 (2)粗分离——透析:除去样品中分子量较小的杂质。 (3)纯化:一般采用凝胶色谱法对血红蛋白进行分离和纯化。 (4)纯度鉴定:一般用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,来测定蛋白质的分子量,即对血红蛋白进行纯度鉴定。 (1)将实验流程补充完整:A为________,B为________。凝胶色谱法的基本原理是根据________而达到蛋白质分离的有效方法。 (2)洗涤红细胞的目的是去除________,洗涤次数过少,无法除去________;离心速度过高和时间过长会使______________一同沉淀,达不到分离的效果。洗涤干净的标志是____________。释放血红蛋白的过程中起作用的是__________________。 (3)在洗脱过程中加入物质的量浓度为20 m
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