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- 2016-12-28 发布于重庆
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第三章 初级分离 3.1 沉淀分级 定义:沉淀(Precipitation)是物理环境的变化引起溶质溶解度降低,生成固体凝聚物的现象。 沉淀的纯度远低于结晶,是一种初级分离技术。但多步沉淀操作也可制备高纯度的目标产物。 目前广泛应用于蛋白质等生物产物的分离。 优点:设备简单,成本低,收率高, 浓缩倍数高,操作简单。 缺点:过滤困难,产品质量较低,针对复杂体系而言,分离度不高、选择性不强。 常用沉淀方法的分类 3.1.1 蛋白质的表面特性 蛋白质沉淀的两大屏障:1)蛋白质周围的水化层; 2)蛋白质分子间的静电排斥作用。 静电斥力 3.1.2 盐析沉淀 一、原理 盐析(Salting-out ):蛋白质在高离子强度溶液中溶解度降低,发生沉淀的现象。 吸引力 (与离子强度有关) 盐析过程 当中性盐加入蛋白质分散体系时可能出现以下两种情况: (1)“盐溶”现象—低盐浓度下,蛋白质溶解度增大 (2)“盐析”现象—高盐浓度下,蛋白质溶解度下降 离子强度对盐析过程的影响 Cohn经验公式 S—蛋白质溶解度,g/L; I—离子强度 β和Ks的物理意义 β—盐浓度为0时,蛋白质溶解度的对数值。与蛋白质种类、温度、pH值有关,与盐无关; Ks—盐析常数,与蛋白质和无机盐的种类有关,与温度、pH值无关。 Ks盐析法:在一定
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