制备和应用固定化酶精选.pptVIP

* 思考：通过课题背景分析，你有何体会？ 酶： 优点：摧化效率高，低耗能，低污染 实际问题：对环境条件敏感，易失活；溶液中的酶 很难收回，不能被再次利用，提高了生产成本； 反应后酶混在产物中，如不去除，会影响产品的品质 设想：将酶固定在不容于水的载体上 固定化酶：优点：酶即能与反应物接触，又容易与反应物分离，同时，还可以反复利用 实际问题：一种酶只能催化一种化学反应，而在生产实践中，很多产物的形成都是通过一系列的酶促反应才能完成的 设想：酶是细胞合成的，能否将合成酶的细胞直接固定？ 固定化细胞：成本低，操作更容易 一、课题目标 1．说出固定化酶和固定化细胞的作用和原理。 2．尝试制备固定化酵母细胞，并利用固定化酵母细胞进行酒精发酵。 思考：1、如何利用固定化酶生产高果糖浆的？ 2、有哪些优点？ 了解 3、固定化酶的方式有哪些？ 思考：直接使用酶、固定化酶与固定化细胞各有什么优缺点？ 固定后的酶或细胞与反应物不容易接近，可能导致反应效果下降等。 成本低，操作更容易。 固定化细胞 一种酶只能催化一种化学反应，而在生产实践中，很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能得到的。 酶既能与反应物接触，又能与产物分离，同时，固定在载体上的酶还可以被反复利用。 固定化酶 对环境条件非常敏感，容易失活；溶液中的酶很难回收，不能被再次利用，提高了生产成本；反应后酶会混在产物中，可能影响产品质量。 催化效率高，低耗能、低污染等。 直接使用酶 不足 优点 类型 课堂讨论： 1．从操作角度来考虑，你认为固定化酶技术与固定化细胞技术哪一种方法更容易？哪一种方法对酶活性的影响更小？ 2．固定化细胞固定的是一种酶还是一系列酶？ 3．如果想将微生物的发酵过程变成连续的酶反应，应该选择哪种方法？ 4．如果反应物是大分子物质，又应该选择哪种方法？ 固定化细胞技术 固定化细胞固定的是一系列酶 固定化细胞技术 固定化酶技术 （3）配制海藻酸钠溶液： 0.7g海藻酸＋10mL水→50mL烧杯→酒精灯微火（或间断）加热，并不断搅拌，使之溶化→蒸馏水定容到10mL。 〖思考4〗微火加热并不断搅拌的目的是什么？ （4）海藻酸钠溶液与酵母细胞的混合： 将溶化的海藻酸钠溶液冷却至室温，加入活化酵母细胞液，搅拌后吸入到注射器中。 防止海藻酸钠焦糊。 1．制备固定化酵母细胞 （1）酵母细胞的活化： 1g干酵母2．实验设计＋10mL蒸馏水→50mL烧杯→搅拌均匀→放置1h，使之活化。 〖思考3〗活化是指什么？ （2）配制CaCl2溶液： 0.83gCaCl2＋150mL蒸馏水→200mL烧杯→溶解备用。 活化是指让处于休眠状态的微生物重新恢复正常生活状态的过程。 〖思考5〗为什么要海藻酸钠溶液冷却后才能加入酵母细胞？ （5）固定化酵母细胞： 以恒定速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到CaCl2溶液中，形成凝胶珠状颗粒。 防止高温杀死酵母细胞。 2．固定化酵母细胞的发酵 （6）冲洗：将固定的酵母细胞凝胶珠用蒸馏水冲洗2～3次。 （7）发酵：150mL10％葡萄糖＋固定化酵母细胞→200mL锤形瓶→密封→25℃发酵24h。 〖思考6〗发酵过程中锥形瓶为什么要密封？ 〖思考7〗锥形瓶中的气泡和酒精是怎样形成的？ 〖思考8〗在利用固定化酶或固定化细胞进行生产的过程中，需要无菌操作吗？ 酵母菌的酒精发酵需要缺氧条件。 酵母菌进行无氧呼吸产生的。 需要。 例1．下列有关固定化技术的叙述，正确的是（ ） A．固定化酶只是在细胞内才能发挥作用 B．固定化酶能提高酶的利用率 C．酶的固定是酶分离纯化的常用方法 D．固定化酶的固定化方式就是吸附在固体表面上。 B 例2．关于固定化细胞的叙述，正确的是 A．催化效率高，低耗能、低污染 B．对环境的条件非常敏感，容易失活 C．既能与反应物充分接触，又能与产物分离 D．成本低、操作简单，但反应效果可能很低 C * * *