牛血清白蛋白的分离提纯工艺.docVIP

课 程 设 计 说 明 书 课程名称：生物分离工程 设计题目：牛血清白蛋白的分离提纯工艺 院系：环境与化学工程学院 学生姓名：孙盼盼 学号：41004020111 专业班级：10级生物工程01班 指导教师：王晓军 2013年6月20日 目 录 1.设计任务书………………........................……………………………………1 2.设计背景…………………....................…………………………….…………1 2.1 牛血清白蛋白分离提纯的简介………....................…………1 2.2 牛血清白蛋白分离提纯的意义.………...............……………1 3.设计原理……............………………………………........………………2 4.设计工艺流程及设计方案说明…....................…………………2 4.1对原材料的粗分级分离……..........……………………………3 4.2对粗分离成分进行细分级分离……..........……………………3 4.3 蛋白的结晶与重结晶……..........………………......…………3 4.4 对分离出的蛋白质进行纯度鉴定……..........…………..……3 4.5 牛血清白蛋白质分离提纯的整个工艺流程……............……3 5.操作过程……..........………………………………..……………4 5.1蛋白质分离的准备阶段……..........………………....…………4 5.2细分级分离设备的设计……..........……………………....……4 5.3蛋白质的纯度鉴定……..........…………………………............8 6.参考文献……..........…………………...........…………...………8 7.课程设计心得……..........……………………......................…9 1.设计任务书 现有一混合物料液中含有酪蛋白（分子量：57000Da，pI 4.5）、β-乳球蛋白（分子量：35000Da，pI 5.1）、α-乳白蛋白（分子量：14000Da，pI 4.2）和牛血清白蛋白（分子量：66200Da，pI 4.7），设计一个分离纯化工艺纯化其中的牛血清白蛋白。 2.设计背景 2.1 牛血清白蛋白分离提纯的简介 蛋白质是（protein）是生命的物质基础，没有蛋白质就没有生命。因此，它是与生命及与各种形式的生命活动紧密联系在一起的物质。机体中的每一个细胞和所有重要组成部分都有蛋白质参与。蛋白质占人体重量的16%~20%，即一个60kg重的成年人其体内约有蛋白质9.6~12kg。人体内蛋白质的种类很多，性质、功能各异，但都是由20多种氨基酸按不同比例组合而成的，并在体内不断进行代谢与更新。 蛋白质具有很多生物化学共性，运用相关性质进行蛋白质的分离制备多种不同的单一蛋白质，更好的为人们所有。蛋白质的分离提纯技术已经很成熟，相关的工艺流程包含各种不同的分离提纯设备，这些设备运用蛋白质的不同原理对其进行分离纯化，单一蛋白质的分离提纯在现实生活中具有重要意义！ 2.2 牛血清白蛋白分离提纯的意义 牛血清中的简单蛋白，是血液的主要成分（38g/100ml），分子量68kD。等电点4.8。含氮量16%，含糖量0.08%。仅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581个氨基酸残基组成，其中35个半胱氨酸组成17个二硫键，在HYPERLINK /view/473692.htm肽链的第34位有一自由巯基。白蛋白可与多种阳离子、阴离子和其他小分子物质结合。血液中的白蛋白主要起维持渗透压作用、PH缓冲作用、载体作用和营养作用。在HYPERLINK /view/1235793.htm动物细胞无血清培养中，添加白蛋白可起到生理和机械保护作用和载体作用。牛血清白HYPERLINK /view/456773.htm蛋白（HYPERLINK /view/571183.htmBSA），又称第五组分，是牛血清中的一种球蛋白，包含583个HYPERLINK /view/687343.htm氨基酸残基，HYPERLINK /view/346251.htm分子量为66200Da，等电点为4.7。牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用，例如在western blot中作为Blocking agent。 设计原理 采用等电点沉淀、凝胶过滤、亲和层析等方法对蛋白质进行分离提纯，对相关分离提纯所需条件可通过与电脑相连的方式