强痛定联合对乙酰氨基酚对神经病理性疼痛大鼠模型促炎因子的影响.docVIP

强痛定联合对乙酰氨基酚对神经病理性疼痛大鼠模型促炎因子的影响 　　[摘要] 目的 观察强痛定联合对乙酰氨基酚治疗神经病理性疼痛大鼠促炎症细胞因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1（IL-1）和前列腺素E2（PGE2）的影响。 方法 40只SD大鼠随机分为5组：假手术组、坐骨神经慢性压迫模型（CCI）组、对乙酰氨基酚组、强痛定组和联合组（n = 8）。手术前1天和手术后第1，3，5，7天测定各组动物的机械性痛阈和热痛阈。采用酶联免疫吸附实验方法检测脊髓TNF-α、IL-1和PGE2浓度变化。采用t检验和方差分析法进行结果分析。 结果 CCI可导致大鼠机械性痛阈和热痛阈明显降低，CCI组脊髓TNF-α[（3.25±0.34）pg/mg]、IL-1[（15.36±1.49）pg/mg]和PGE2[（162.57±13.63）pg/mg]升高。与CCI组比较，两种药物联合治疗后能明显改善CCI大鼠痛敏状态，差异均有统计学意义（均P 0.05），并显著降低TNF-α[（1.58±0.27）pg/mg]、IL-1[（7.61±0.85）pg/mg]和PGE2[（95.16±8.74）pg/mg]的表达，差异均有统计学意义（均P 0.05）。 结论 两种药物联合抑制炎症细胞因子释放可减轻CCI大鼠的疼痛反应。 　　[关键词] 神经病理性疼痛；促炎因子；强痛定；对乙酰氨基酚 　　[中图分类号] R614.1 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）07（a）-0034-03 　　神经病理性疼痛是一种慢性疾病，由中枢或外周神经系统损伤或疾病所引起，比如偏头痛和纤维肌痛，临床上尚缺乏有效满意的治疗手段，对患者是沉重的负担[1]。因此，慢性疼痛的治疗成为世界性的难题。目前研究显示，组织损伤或感染导致的炎性细胞因子的正调节可触发痛觉神经元的过度兴奋。这些促炎细胞因子在病理性疼痛中起着关键作用[2-3]。强痛定联合对乙酰氨基酚均是临床上常用的镇痛药，本研究釆用坐骨神经慢性压迫大鼠模型（CCI）来建立神经病理性疼痛模型，观察强痛定联合对乙酰氨基酚对大鼠机械痛觉超敏和热痛觉过敏的影响，并从多种促炎因子对其机制进行了初步探索。报道如下： 　　1 材料与方法 　　1.1 动物来源及分组 　　成年SD雄性大鼠40只（由中南大学湘雅医学院动物实验中心提供），体重200～250 g，经过机械痛阐和热痛阐测量的筛选，反应异常鼠被剔除。保证12 h明暗交替，大鼠自由饮水和饮食，给其1周的时间适应环境后，进行实验。分为5组：假手术组、CCI组、对乙酰氨基酚组、强痛定组和联合组。 　　1.2 CCI模型的建立 　　根据文献[4]建立坐骨神经慢性压迫模型（CCI）。10%水合氯醒300 mg/kg腹腔注射麻醉大鼠，左侧股骨区消毒铺无菌巾，左侧大腿中部股骨外缘与股骨平行的方向切开皮肤，分离肌间筋膜，暴露坐骨神经主干，在坐骨神经三叉分支的近侧端约5 mm处，用4-0羊肠线均匀结扎四处，间隔约1 mm，松紧程度以引起小腿肌肉轻微颤动且不影响坐骨神经血运为宜。结扎完毕，缝合皮肤。手术完毕每只大鼠肌注庆大霉素霉素8万U单位，置于温暖清洁的环境中。假手术组仅暴露坐骨神经而不进行结扎，剩余4组建立CCI模型。CCI组：不进行任何治疗。对乙酰氨基酚组：100 mg/kg腹腔注射。强痛定组：1 mg/kg腹腔注射。联合组：对乙酰氨基酚100 mg/kg+强痛定1 mg/kg腹腔注射。 　　1.3 行为学测试 　　1.3.1 测定各组大鼠左侧后爪热痛阈值（PWTL） 大鼠被置于热痛仪透明隔断里并盖上盖子，待大鼠适应环境后开始测量热痛阈值。测量时将热痛仪十字交叉处的红光对准大鼠后爪中央部位。按下测量钮，当大鼠自觉疼痛出现抬足、舔足反射时，控制面板上记录到的时间即为大鼠此次测量的PWTL。同一只大鼠至少间隔5 min进行下次测试，每只大鼠测定3次，取平均值作为该大鼠的PWTL值。 　　1.3.2 测试大鼠左后肢机械痛阈值（PWMT） 将Von-Frey探针装入测量仪上，开启仪器，在网格板下持探针垂直向上接触大鼠后爪中心部位，大鼠适应后再加大力量继续往上。大鼠自感疼痛出现抬足、舔足反射时，仪器记录到的数值即为此次大鼠的PWMT。测试次数和平均值方法同上。各组大鼠均在CCI建模前、建模后1、3、5 d及7 d测试PWTL和PWMT。 　　1.4 ELISA测定脊髓肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1（IL-l）、前列腺素E2（PGE2）浓度 　　术后第8天大鼠断头处死，取出整段脊髓组织放入-80℃冰箱保存。将100 mg脊髓组织提取液中研磨至匀浆，取出上清液冰冻保存。采用考马斯亮蓝比色法测定蛋白浓度，在紫外分光光度仪上测定吸光