液基细胞学、HPV―DNA及hTERC基因联合检测在宫颈癌筛查中的实际应用.docVIP

液基细胞学、HPV―DNA及hTERC基因联合检测在宫颈癌筛查中的实际应用 　　【摘 要】目的：液基细胞学、HPV-DNA及hTERC基因联合检测在宫颈癌筛查中的实际应用价值探讨。方法：我院于2011年8月～2012年8月共采集筛选125例宫颈疾病患者的细胞标本，分别采用HPV-DNA检测、TCT检测、hTERC基因检测。结果：仅采用一种方法进行筛查时以TCT方法最为敏感，但特异度较低，hTERC检测方法联合HPV或TCT进行筛查时，可同时获得较高的敏感度及特异度，其中以hTERC基因检测+TCT的敏感度最高，hTERC基因检测+ HPV的特异度最高。在各种筛查方法中，以hTERC基因检测+ HPV的符合率及约登指数最高。结论：联合筛查无论是从其敏感度或特异度上来看均优于单一的筛查方法，其中以hTERC基因检测联合HPV检测效果最为理想，但具有较高的成本；而HPV联合TCT筛查不但高效，而且经济，可将该法作为基础筛查方案。 　　【关键词】HPV-DNA；液基细胞学；宫颈癌 　　【中图分类号】R737.33 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2013）05-0054-02 　　宫颈癌作为常见的女性恶性疾病，一直以来严重威胁着广大女性的健康。近年来，随着国内性意识的不断开放及环境条件的恶劣变化，使得我国宫颈癌患者数量快速增长，并且使得患者年龄越来越趋于年轻化[1]。目前宫颈癌的有效预防和治疗的关键在于癌前病变的早期治疗。 　　1 研究对象及方法 　　1.1研究对象 　　我院于2011年8月～2012年8月共采集筛选125例宫颈疾病患者的细胞标本，标本均为患者宫颈脱落细胞，患者年龄最大65岁，最小23岁。根据病理组织学对所有患者进行分型，其中，20例为慢性宫颈炎，20例为CINⅠ型，45例为CINⅡ及Ⅲ型，25例为宫颈癌。同时采集健康体检女性宫颈脱落细胞15例，采用细胞学检查，结果均提示为阴性。细胞标本采集选用专用的TCT塑料软刷，采集时将软刷伸至宫颈管中，轻轻旋转软刷获取细胞标本，然后将标本保存在装有Thinprep保存液的专用存储瓶内[2]。 　　1.2 方法 　　①将所有患者的存液标本采用TCT检测，处理系统采用Thinprep2000，将上皮细胞与炎细胞、血液及?液分离后，采用高度精密过滤器进行过滤，将处理好的标本涂至玻片上并制成涂片，进行巴氏染色，采用95%酒精固定，然后放置显微镜下观察。②HPV检测：采用北京金菩嘉人乳头瘤病毒分型试剂盒，应用等离子表面振谐技术（SPR）进行HPV基因分型检测。检测型别包括[3]：16种高危型和8种低危型，共24种。③hTERC基因检测：采用北京金菩嘉宫颈细胞hTERC位点扩增检测试剂盒，应用荧光原位杂交（FISH）技术，检测剩余标本，按FISH操作步骤制片、变性杂交、洗涤、复染、100倍物镜下信号计数。④宫颈阴道镜活检及病理学检查：对以上3种检测任一结果阳性者行常规阴道镜下宫颈多点活检术，必要时行颈管搔刮术，该术由固定的妇产科医师操作。活检标本放入盛有10%甲醛溶液的标本瓶中保存送病理学检查。 　　2 结果 　　①仅采用一种方法进行筛查时，其中以TCT方法最为敏感，其敏感度可达85.6%，HPV检测次之，为72.1%，两者的缺点为特异度较低。虽然仅采用hTERC基因检测方法时敏感度较低，但该方法具有较高的特异度。②同时联合使用两种检测方法时，敏感度最高的为HPV+TCT检测方法，然而具有最低的特异度。hTERC检测方法联合HPV或TCT进行筛查时，可同时获得较高的敏感度及特异度，其中以hTERC基因检测+TCT的敏感度最高，hTERC基因检测+ HPV的特异度最高。③在上述各种筛查方法中，以hTERC基因检测+ HPV的符合率及约登指数最高，这说明该检测方法最具真实性，筛查结果最为准确。 　　3 讨论 　　宫颈癌是最为常见的女性恶性肿瘤之一，在女性疾病中，具有较高的发病率和病死率，仅次于乳腺癌。在全球范围内，每年约有50万女性新患宫颈癌，同时约有25万女性死于该疾病[4]。近些年来，随着医疗技术的不断发展及医疗体系的逐步完善，在患者早期浸润癌及宫颈癌病变前期采用有效的筛查手段可及时做出明确诊断，并及时采取合理的治疗方案，可有效降低该疾病的发病率和病死率。世界卫生组织近些年强烈推荐采用乳头状瘤病毒的DNA检测及宫颈细胞学检测来进行宫颈癌的早期筛查。目前，在西方各发达国家，细胞学蹄查已得到了广泛应用，且其宫颈癌发病率及病死率得到了明显降低。而在大多相对落后的发展中国家，该病依然是危害广大女性健康的严重问题。有效治疗宫颈癌的关键在于发生病变前的早期诊断，病变前期，特别是麟状上皮内瘤样病变以目前的医疗水平是可以得到有效治疗的，从而有效控制病症向宫