分子生物学复习题...docVIP

概念： 假基因(pseudogene):具有与功能基因相似的序 列，但由于有许多突变以致失去了原有的功能。 穿梭载体（shuttle vector）：在不同类型受体细胞(如酵母与细菌、细菌与动物细胞等)中都能够进行复制的克隆载体。 star activity）：非标准反应条件下，内切酶识别切割能力下降，识别特异性下降。competent cell）：细胞膜结构改变、通透性增加并具有摄取外源DNA能力的细胞称为 分子克隆(molecular?cloning)：在体外对DNA分子进行重组，构建成具有自主复制能力的重组DNA分子，再导入宿主细胞进行大量扩增，最终获得大量同一的DNA分子。 生物芯片biochip:指采用光导原位合成或微量点样等方法，将大量生物大分子有序地固化于支持物的表面，组成密集二维分子排列，然后与已标记的待测生物样品中的靶分子杂交，通过特定的仪器对杂交信号的强度进行快速、并行、高效地检测分析，从而判断样品中靶分子的数量。 iRNA(RNA干扰): 是由dsRNA介导的由特定酶参与的特异性基因沉默现象,它在转录水平、转录后水平和翻译水平上阻断基因的表达单链核酸碱基序列的技术。 质粒(plasmid):细菌细胞染色体以外，能独立复制并稳定遗传的共价闭合环状分子。 基因重叠（gene overlapping）：基因组DNA中某些序列被两个或两个以上的基因所共用。 基因组文库（genomic library）：是指含有某 种生物全部基因随机片段的重组DNA克隆群。 回文结构(palindrome)：双链DNA中含有的二个结构相同、方向相反的序列被限制酶所识别 载体（vector）:携带靶DNA（目的DNA）片段进入宿主细胞进行扩增和表达的运载工具。 转染（transinfection）：将外源DNA直接导入真核细胞的过程。 填空 癌基因包括病毒癌基因和细胞癌基因 质粒的结构包括共价闭环DNA分子、　　　　　 半开环DNA分子、线性DNA分子 质粒的选择性标记是抗药性基因 转座子的遗传效应是转座子的遗传效应、引入新基因、基因重排 几乎所有人类肿瘤中都存在p53基因的突变 问答题 原核生物基因组特点 答：1.原核生物基因组中只有一个DNA分子组成，多数呈环状2. 基因组中只有一个复制起点，基因数目较少3.具有类核结构 4.具有操纵子结构5.结构基因常为单拷贝6.无重叠基因现象7.具有编码同工酶的基因8.编码区在基因组中的比例9.基因组中存在重复序列10.基因组中存在着可移动的DNA序列，包括插入序列和转座子，也包括质粒。 病毒基因组特点 答：1.基因组的碱基组成2.基因组核酸类型3.基因组中有基因重叠现象4.基因组中具有操纵子结构5.病毒基因可连续也可间断6.基因组中重复序列少7.基因组中非编码区少8.基因组是单倍体9.相关基因丛集10.病毒基因组含有不规则结构基因 ，转录出 多种mRNA分子 真核生物基因组特点 答：1.真核生物基因组DNA与蛋白质结合形成染色体，即有两份同源的基因组。2.真核细胞基因转录产物为单顺反子。3.存在重复序列，重复次数可达百万次以上。4.基因组中不编码的区域多于编码区域。5.大部分基因含有内含子，基因是不连续的。6.基因组远远大于原核生物的基因组，具有许多复制起点，而每个复制子的长度较小。生长因子类src家族GGATCC CCTAGG 切口 ： 平端切口 -- 平末端 粘端切口 -- 粘性末端 ?5′-G▼AATT C-3′????????????????3′-C TTAA▲G-5′为EcoR识别序列，其中黑三角所指便是EcoR的切割位点。：①目的基因的获②目的基因与载体的接③重组DNA分子导入受体细胞④筛选含重组分子的受体细胞⑤克隆基因的表达及表达产物的检测和分离纯化。 基因组文库、cDNA文库概念及构建的方法 答：基因组文库:是指含有某种生物全部基因随机片段的重组DNA克隆群。构建：分离纯化染色体DNA→DNA片段→DNA片段与载体的连接→重组DNA分子导入受体细胞→阳性克隆的筛选cDNA文库：如以细胞全部mRNA经逆转转录，制备出全套cDNA建库，则称为C文库。构建：分离纯化总RNA→制备mRNA→合成CDNA第一链→合成CDNA第二链→CDNA片段与载体连接→重组DNA分子导入受体细胞 分子杂交的种类及用途 答：种类：1. 液相杂交 用途：DNA染色体分析、 三体分析、染色体作图、分裂间期研究、产前诊断、 CGH 2.固相杂交又可分为①菌落杂交、②Southern blot用途： 单基因遗传病的基因诊断、基因突变的检测③Northern blot用途：RNA病毒的检测、基因表达的检测④点杂交和狭缝杂交 3.原位杂交 用途