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蛙离体神经干生物电信号与兴奋性的检测 ?一、 实验目的：1.蛙离体神经干的制备2.学习生物电信号的引导，观察并分析神经干复合动作电位波形。 二、制备蛙离体坐骨神经干标本 1.破坏脑脊髓 2.剪除躯干上部及内脏: 骶髂关节水平以上1cm处剪断脊柱 3.剥皮,并洗净手和用过的器械 4.游离坐骨神经,至踝关节（神经分离干净、足够长、滴加任氏液） 5.仪器的连接：? 1 2 粗 细 r1 r2 r3 r4 红 红 红 黑 黑 绿 绿 仪器连接 RM6240C微机生物信号处理系统 神经干标本盒。 S+ S- E R1 - R1+ R2- R2+ 神经干标本盒两对引导电极分别接微机生物信号处理系统1、2通道 三.实验观察项目 1. 引导双相动作电位； 阈强度、最大刺激强度(同步触发) 2. 神经干动作电位传导速度的测定 3. 神经兴奋性周期变化的检测（最大刺激强度） 4. 单相动作电位 1.??? 引导双相动作电位 刺激伪迹 AP 刺激器 放大器 + － 地 刺激电流 i- i+ R+ R- 地 刺激伪迹是刺激电流通过导电介质扩散至两引导电极而形成的电位差信号。与刺激同步，随刺激强度增大而增大。 双相动作电位原理？ ------------ +++++++++ -+--------- +-+++++++ R 1 = R 2 R 1 ＜ R 2 R 1 = R 2 ++++-++++ -----+----- --------+-- ++++++-++ R 1 ＞ R 2 外 内 外 内 内 外 内 外 ①阈强度：对神经干而言，指神经干刚好能产生动作电位的刺激强度（恰能诱发动作电位时的刺激强度）②最大刺激强度：能产生最大动作电位 的最小刺激强度（动作电位幅度不随刺激强度增大而增加） 阈强度、最大刺激强度 0V 0.25V 0.3V 0.4V 0.5V 0.6V 0.7V 0.8V 0.9V A A 1.“全”或“无” 2.不衰减传导 3.脉冲性 复合动作电位 单个细胞AP 胞外两点间电位差 细胞内外电位差 阈强度 最大刺激强度 阈强度 无最大刺激强度 为什么在一定范围内（阈上刺激），刺激强度越大，神经干所形成的动作电位越大？ 这是因为随着刺激强度的增加，神经干上兴奋的神经纤维越来越多的缘故。 2.测定传导速度(自动/手动) V=S/t（m/s） S1 S2 r1 r4 r3 r2 S(cm) 3.检测兴奋性周期变化 绝对不应期 相对不应期 超常期 低常期 0 随着波间隔的缩小，越来越多神经纤维在接受第二个刺激时已处于第一个刺激诱发的兴奋不应期，所产生的复合动作电位波幅就减小了。 S1 S2 r1 r4 r3 r2 4.? 单相动作电位 （1）彻底夹伤r1与r2之间神经干 （2）产生单相AP原因 兴奋不能传导至B点 注意事项：1）神经标本尽可能长，仔细除净附着于神经干上的结缔组织膜及血管，不能损伤牵拉神经干。2）神经干不可与标本盒壁接触，也不要把神经干两端折迭在电极上，以免影响动作电位波形。3）每次刺激后，应注意休息半分钟，再进行下次刺激。4）保持标本湿润，但电极和神经上不能带有水珠，以免短路。 单刺激方式，刺激幅度0.1~3V，刺激波宽0.1ms，延迟5ms，同步触发。 实验参数 采样频率 通道模式 扫描速度 灵敏度 滤波频率 时间常数 为什么AP1较AP2出现早且波形幅度大呢？ 粗 细