【南方新课堂】2016-2017学年高中生物 1.1 DNA重组技术的基本工具课件 新人教版选修3.pptVIP

* 目标导航 预习导引 目标导航 预习导引 一 二 三 一、基因工程的诞生和发展 基因工程的基础理论和技术支持(连线): 四 目标导航 预习导引 一 二 三 二、基因工程的概念 1.操作场所:生物体外。 2.操作技术:体外DNA重组和转基因等技术。 3.操作结果:赋予生物新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 4.操作水平:DNA分子水平。 (1)工具酶的发现为基因工程作了什么技术支持? 提示为DNA的切割、连接以及目的基因的获得创造了条件。 (2)利用基因工程实现的基因重组与杂交育种实现的基因重组有什么不同? 提示前者是定向的,目的性强;后者是不定向的,获得所需要的重组性状所用的时间一般比较长。 四 目标导航 预习导引 一 二 三 三、基因工程的基本工具 1.限制性核酸内切酶(限制酶)——“分子手术刀” (1)来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。 (2)功能:能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 (3)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式——黏性末端和平末端。 四 目标导航 预习导引 一 二 三 2.DNA连接酶——“分子缝合针” (1)作用:将切下的双链DNA片段“缝合”,恢复被限制酶切开的磷酸二酯键,拼接成新的DNA分子。 四 目标导航 预习导引 一 二 三 3.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车” (1)最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外,并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子。 (2)其他载体:λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。 (3)载体的特点:①能够在细胞中自我复制;②有一个至多个限制酶切割位点,便于外源DNA片段(基因)的插入;③具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。 四 目标导航 预习导引 一 二 三 四 四、重组DNA分子的模拟操作 1.材料用具:剪刀代表EcoRⅠ,透明胶条代表DNA连接酶。 2.切割位点: (1)分别从两块硬纸板上的一条DNA链上找出G-A-A-T-T-C序列,并选G-A之间作切口进行“切割”。 (2)从另一条链上互补的碱基之间寻找EcoRⅠ相应的切口剪开。 3.连接:待硬纸板上的切割位点全部切开后,将不同硬纸板上的DNA片段重组在一起,用透明胶条将切口黏结起来。 4.操作结果:若操作正确,不同颜色的黏性末端能互补配对;否则,说明操作有误。 目标导航 预习导引 一 二 三 四 限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的,迄今已从近300种不同的微生物中分离出了约4 000种限制酶。 (1)你能推测限制酶在原核生物中的作用是什么吗? 提示原核生物容易受到外源DNA的入侵,但生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制,以防止外源DNA的侵害。限制酶就是细菌的一种防御性工具,当外源DNA侵入时,限制酶会将外源DNA切割掉,以保证自身的安全。所以限制酶在原核生物中主要切割外源DNA使之失效,从而达到保护自身的目的。 目标导航 预习导引 一 二 三 四 (2)为什么限制酶不剪切细菌本身的DNA? 提示在长期演化过程中,含有某种限制酶的细菌,其DNA分子中或者不具备这种限制酶的识别序列,或者通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上,使限制酶不能将其切开。这样,尽管细菌中含有某种限制酶也不会使自身的DNA被切断,并且可以防止外源DNA的入侵。 (3)你能用图示表示出EcoRⅠ限制酶是如何切割DNA片段的吗? 提示如下图: 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 一、几种酶的比较 1.限制性核酸内切酶与DNA连接酶的比较 (1)区别: 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 (2)两者的关系可表示为: 2.限制性核酸内切酶与解旋酶的比较 (1)相同点:都作用于DNA分子。 (2)不同点:作用部位不同,前者作用于磷酸二酯键,后者作用于氢键。 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 3.与DNA有关的几种酶 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 4.上述四种酶的作用部位图解 作用位点示意图 作用于a(磷酸二酯键)的酶有限制酶、DNA连接酶、DNA聚合酶; 作用于b(氢键)的酶有解旋酶。 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 【例1】 下图为DNA分子结构示意图,下列对该图的描述正确的是(　　) A.④的名称是胞嘧啶脱氧核苷酸 B.解旋酶作用的部位是⑩ C.某限制性核酸内切酶可选择⑨处作为切点 D.DNA连接酶可连接⑩处断裂的化学键 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 解析图中④所包含的①磷酸与②脱氧核糖、③碱基不是同一个脱氧核苷酸的成分,A项错误;解旋酶的作用是解开DNA双链,作用部位是⑨氢键,B项错误;限制性核酸内切酶的作