分子生物学考试重点..doc

1.简述真核生物的染色体结构，它们是如何组装的？有几种组蛋白参与核小体的形成？ 真核生物的染色体十分复杂，具有不同层次的组装结构，染色质分为常染色质和异染色质两种。在常染色质中DNA的压缩比为1 000—2 000，相对比较伸展，主要为单拷贝基因和中等重复序列。异染色质是指在间期核中DNA折叠压缩程度较高，约8000-10000倍,以凝集状态存在，对碱性染料着色较深的区域。 在着丝粒、端粒、次缢痕以及染色体的某些节段，由较短和高度重复的DNA序列组成永久性的异染色质。另一些染色质区域随细胞分化而进一步折叠压缩，以封闭基因活性，称为功能性异染色质。染色质的基本结构单位是核小体。 核小体是由组蛋白核心和盘绕其上的DNA构成。核心由组蛋白H2A、H2B、H3和H4各2分子组成，所以是一个八聚体。 在 DNA分子上的每一条链都含有合成它的互补链所必需的全部遗传信息。在复制过程中首先是双链解旋并分开，之后以每条链作为模板在其上合成新的互补链，其结果是由一条链可以形成互补的两条链。这样新形成的两条双链DNA分子与原来DNA分子的碱基顺序完全一样。在此过程中，每个子代分子的一条链来自亲代DNA，另一条链则是新合成的，这种方式称为半保留复制。 在DNA复制过程中每个复制叉中的前导链连续复制，而后随链是以反方向合成不连续的短片段。最后再由连接酶连接成连续的DNA序列，这种复制方式称为半不连续复制。 半保留复制的生物学意义是，在半保留复制中碱基配对是核酸分子间传递遗传信息的结构基础。无论是复制、转录或逆转录，在形成双链螺旋分子时都是通过碱基配对来完成的。这种复制机制还说明了DNA分子在代谢上的稳定性，经过许多代的复制，DNA多核苷酸链仍可保持完整，并存在于后代而不被分解。与细胞的其他成分相比这种稳定性与它的可遗传功能是相符合的。 9. 简述以下DNA复制酶与蛋白质因子的体系，DNA聚合酶Ⅰ、Klenow片段、DNA聚合酶Ⅱ、DNA聚合酶Ⅲ、γ复合物、 夹子装置器、DNA连接酶、SSB、HU、DnaA 、DnaB 、DnaC 、 两类拓扑异构酶 DNA聚合酶Ⅰ是多功能酶。可催化以下几种反应： ①通过核苷酸聚合反应，使DNA链沿3ˊ→ 5ˊ方向延长(聚合酶活性)；②由3ˊ端水解DNA链(3ˊ→ 5ˊ核酸外切酶活性)；③由5ˊ端水解DNA链(3ˊ→ 5ˊ核酸外切酶活性)；④由3ˊ端使DNA链发生焦磷酸解；⑤无机焦磷酸与脱氧核糖核苷三磷酸之间的焦磷酸基交换。焦磷酸解是聚合反应的逆反应，焦磷酸交换反应由前两个反应连续重复多次引起。因此，DNA聚合酶I兼有聚合酶、3ˊ→ 5ˊ核酸外切酶和5ˊ→ 3ˊ核酸外切酶的活性。在聚合酶活性中心，与这些功能相关的结合位置分布十分精巧而灵活。 DNA聚合酶Ⅱ为多亚基酶，其聚合酶亚基由一条相对分子质量为88 000的多肽链组成。这个酶的活力比DNA聚合酶I高。NA聚合酶Ⅱ具有3ˊ→ 5ˊ核酸外切酶活性，但无5ˊ→ 3ˊ活性。DNA聚合酶Ⅱ也不是复制酶，而是一种修复酶。 DNA聚合酶Ⅲ是由多个亚基组成的蛋白质，亚基很容易解离，全酶(holoenzyme)由α、β、γ、δ、δ′、ε、θ、τ、χ 和ψ10种亚基所组成，除合成速度比聚合酶I快外其他性质与聚合酶I基本相同。DNA聚合酶Ⅲ的其他许多性质都表明它是DNA复制酶。 DNA聚合酶Ⅰ被蛋白酶切开得到的大片段称为Klenow片段，具有催化DNA聚合作用和3ˊ→ 5ˊ校对功能。 聚合酶III中的γ亚基是一种依赖DNA的ATP酶，全酶中的γ复合物由6个亚基(γ2δδ′χψ)构成，主要功能是协同β亚基嵌住模板DNA，又称夹子装置器。 3类RNA聚合酶都有几种共同的亚基：根据其结构与功能，可以分为核心亚基、???????共同亚基和非必须亚基。 帽子结构的功能??????? （1）??对翻译起识别作用------为核糖体识别RNA提供信号，Cap0?的全部都是识别的重要信号，?Cap1,2?的甲基化能增进识别?? （2）??增加mRNA?的稳定性，使5’端免遭外切核酸酶的攻击??(3)????有助于mRNA越过核膜，进入胞质? poly(A)?的功能??????????? ??（1）?可能与核质转运有关? （2）?增强mRNA稳定性?????????（3）?增强可翻译能力? 9、Lac操纵子调控机制总结?? ?????当低葡萄糖而高乳糖时，部分乳糖在β－半乳糖苷酶作用下转变为异乳糖，异乳糖可作为诱导物和有活性阻遏蛋白结合，使阻遏蛋白失活，不能结合O，RNA聚合酶顺利结合启动子，起始转录利用乳糖的酶；同时，由于没有葡萄糖存在，胞内cAMP浓度高，大量的?cAMP－CAP复合物结合在CAP位点，极大的促进下游结构基因转录效率，β－半乳糖苷酶、通透酶和转乙酰酶的含量高，