2蛋白质生化概述.ppt

第二章 蛋白质 （protein） 1878年，思格斯就在《反杜林论》中指出：“生命是蛋白体的存在方式, 这种存在方式本质上就在于这些蛋白体的化学组成部分的不断的自我更新。” 可以看出，第一，蛋白体是生命的物质基础；第二，生命是物质运动的特殊形式，是蛋白体的存在方式；第三，这种存在方式的本质就是蛋白体与其外部自然界不断的新陈代谢。 现代生物化学的实践证实并发展了恩格斯的论断。 经凯氏定氮法测得一血清样品含N量为10 g/L，该血清中蛋白质的浓度大约为 （ ）。 A、52.5 g/L B、57.5 g/L C、62.5 g/L D、6.25 g/L 测得一蛋白质样品的氮含量为0.4 g，此样品约含蛋白质多少？A．2．00g　B．2．50g　C．6．40g　D．3．00g　E．6．25g 简单蛋白质 这类蛋白质只含由?-氨酸组成的肽链，不含其它成分 1、清蛋白 广泛存在于生物体内，如血清清蛋白、乳清蛋白等。 2、球蛋白 普遍存在于生物体内，如血清球蛋白、肌球蛋白和植物种子 球蛋白等。 3、谷蛋白 如米谷蛋白和麦谷蛋白等。 4、醇溶谷蛋白 这类蛋白质主要存在于植物种子中。如玉米醇溶蛋白、麦醇溶蛋白等。 5、组蛋白 分子中组氨酸、赖氨酸较多，分子呈碱性。如小牛胸腺组蛋白等。 6、鱼精蛋白 分子中碱性氨基酸特别多，因此呈碱性。如鲑精蛋白等。 7、硬蛋白 这类蛋白是动物体内作为结缔及保护功能的蛋白质。例如，角蛋白、胶原、网硬蛋白和弹性蛋白等。 结合蛋白质 由简单蛋白与其它非蛋白成分结合而成 1、核蛋白 辅基是核酸，如脱氧核糖核蛋白、核糖体、病毒等。 2、糖蛋白和蛋白聚糖 辅基成分为半乳糖、甘露糖、硫酸或磷酸等。 3、脂蛋白 与脂质结合的蛋白质，脂质成分有磷脂、固醇和中性脂等。 4、磷蛋白 磷酸基通过酯键与蛋白质中的丝氨酸或苏氨酸残基侧链相连。如酪蛋白、胃蛋白酶等。 5、色蛋白 蛋白和色素组成，以含卟啉类的色蛋白最为重要。 6、黄素蛋白 辅基为黄素腺膘呤二核苷酸。如琥珀酸脱氢酶 7、金属蛋白 与金属直接结合的蛋白质。 完全水解得到各种氨基酸的混合物，部分水解通常得到多肽片段。最后得到各种氨基酸的混合物。 所以，氨基酸是蛋白质的基本结构单元。 稀酸、稀碱水解生产蛋白胨 用稀酸或稀碱溶液长时间保温，可使蛋白质发生不完全水解。常用的酸碱有HCl、H2SO4、NaOH、Ca(OH)2等。如用碱法水解明胶废渣产生蛋白胨，将明胶废渣加水浸泡，加Ca(OH)，调pH 11-12，100℃保温水解5-6 h，经中和、过滤、浓缩、干燥，即得培养基用蛋白胨。 其它的一些蛋白酶： 梭状芽孢杆菌蛋白酶（Arg提供羧基的肽键）、胃蛋白酶、金黄色葡萄球菌V8蛋白酶（Glu/Asp提供羧基的肽键）、羧肽酶A（水解C端除Pro、Arg和Lys以外的肽键）、羧肽酶B（水解C端Lys和Arg的肽键）等。 氨基酸的旋光性 氨基酸的侧链对多肽或蛋白质的结构和生物学功能非常重要。用三字母和单字母缩写形式列出其侧链为如下要求的氨基酸：（a）含有一个羟基的。（b）含有二个氨基的。（c）含有一个具有芳香族性质的基团的。（d）含有分支的脂肪族烃链的。（e）含有硫原子。 氨基酸在结晶形态或在水溶液中，并不是以游离的羧基或氨基形式存在，而是离解成两性离子。在两性离子中，氨基是以质子化(-NH3+)形式存在，羧基是以离解状态(-COO-)存在。 1、精氨酸的pI值为10.76,将其溶于pH7的缓冲液中，并置于电场中，则精氨酸应向电场的_______方向移动 2、当氨基酸溶液的pH=pI时，氨基酸以_____离子形式存在，当pHpI时，氨基酸以_______离子形式存在。 3、今有甲、乙、丙三种蛋白质，它们的等电点分别为8.0、4.5和10.0,当在pH8.0缓冲液中，它们在电场中电泳的情况为：甲_______，乙_______，丙________。  某种溶液中含有三种三肽：Tyr - Arg - Ser , Glu - Met - Phe 和Asp - Pro - Lys , α- COOH基团的pKa 为3.8; α-NH3基团的pKa为8.5。在哪种pH（2.0,6.0或13.0）下，通过电泳分离这三种多肽的效果最好？ 答：pH=6.0比pH=2.0或pH=13.0时电泳能提供更好的分辨率。因为在pH＝6.0的条件下每种肽都带有不同的净电荷(+1，-1，和0)，而在pH＝2.0的条件下净电荷分别为+2，+1和+2，在pH＝13.0的条件下净电荷分别为-1，-2和-2。 一个寡肽，