2.1_微生物的实验室培养教程范本.pptVIP

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(1)根据你所掌握的知识,分析导致生产失败的根源是什么? (2)由此可见,研究和应用微生物的前提是什么? 平板划线时不能划破培养基,为什么? 一旦划破,会造成划线不均匀,难以达到分离单菌落的目的; 二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落,菌落会沿着划破处生长,会形成一个条状的菌落。 本课题知识小结 * 课题1 微生物的实验室培养 1.提供营养和条件 2.防止污染 微生物的类群 原生生物: 原核生物: 真菌: 病毒: 如酵母菌 单细胞的动植物 如草履虫、单细胞藻类等 无细胞结构 真核细胞 细菌、蓝藻 原核细胞 根源在于发酵物中混入了杂菌 防止杂菌入侵,获得纯净的培养物 一、培养基 微生物生存的环境和营养物质 1.基本成分: 碳源、氮源、水、无机盐 ⑴碳源 无机碳源: 有机碳源: CO2、CO32-、HCO3- 牛肉膏、蛋白胨等 自养微生物 异养微生物 ⑵氮源 无机氮源: 有机氮源: NH4+、NO3- 牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等 注:含CHON的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源 一、培养基 微生物生存的环境和营养物质 1.基本成分: 碳源、氮源、水、无机盐 ⑴碳源 无机碳源: 有机碳源: CO2、CO32-、HCO3- 牛肉膏、蛋白胨等 自养微生物 异养微生物 ⑵氮源 无机氮源: 有机氮源: NH4+、NO3- 牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等 注:含CHON的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源 1.基本成分: 碳源、氮源、水、无机盐 2.特殊营养: 维生素、碱基等 (牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有) 3.pH、氧气的需求: 4.种类: 固体培养基 液体培养基 有无 凝固剂琼脂 分离 鉴定 工业 生产 化学成分: 物理性质: 天然培养基 合成培养基 一、培养基 鉴别培养基 用途 合成培养基 天然培养基 化学成分 物理性质 用途 特点 培养基种类 划分标准 培养基的种类 不加凝固剂 加凝固剂,如琼脂 工业生产 微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种 含化学成分不明确的天然物质 工业生产 培养基成分明确 分类、鉴定 在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长 培养、分离出特定微生物 在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物 鉴别不同种类微生物 选择培养基 液体培养基 固体培养基 加入青霉素的培养基: 不加氮源的无氮培养基: 不加含碳有机物的无碳培养基: 几种选择培养基举例: 分离酵母菌、霉菌等真菌 分离固氮菌 分离自养型微生物 唯一碳源为纤维素的培养基 分解纤维素的细菌 牛肉膏蛋白胨培养基 是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。 1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方 H2O 定容至1000ml Nacl 5g 蛋白胨 10g 牛肉膏 5g 琼脂20.0g 分析营养构成? 5. 配制原则 ⑴目的明确: ⑵营养全面、浓度适宜、比例恰当 ⑶适宜的pH值: 有机碳源 异养型: 根据微生物的种类、培养目的选择原料 自养型: 不加碳源 加入缓冲剂 细菌偏碱,真菌偏酸 (CO2碳源) 生产 科研 耐高温需保持干燥的 物品,160~170℃ 1~2小时 接种环、接种针等 金属用具 70~75℃、30min 80℃、15min 100℃、5~6min 消毒 灭菌 定义 方法 较为温和理化方法, 杀死部分有害菌体 (不包括芽孢、孢子) 强烈的理化方法, 杀死所有微生物 (包括芽孢、孢子) 煮沸消毒法 巴氏消毒法 化学药剂 紫外线 灼烧灭菌 干热灭菌 酒精、氯气、石炭酸等 高压蒸汽灭菌 培养基, 100KPa、 121℃、15~30min 防止外来杂菌的污染 1.消毒与灭菌: 二、无菌技术 请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要,请选择合适的方法。 (1) 培养细菌用的培养基与培养皿 (2) 玻棒、试管、烧瓶和吸管 (3) 实验操作者的双手 2.无菌范围: 实验操作空间消毒 操作者的手、衣着消毒 实验用具灭菌 实验操作过程 二.无菌技术: 防止外来杂菌的污染 1.消毒与灭菌: 酒精灯旁操作 超净工作台 四、大肠杆菌的纯化培养 分散成单个细胞, 形成单个菌落 3.功能: 单个 或

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