2.2.1第二课时--核移植技术教程范本.pptVIP

植物组织培养和动物细胞培养的比较 比较项目 植物组织培养 动物细胞培养 原理 植物细胞的 全能性 动物细胞增殖 培养基状态 固体培养基 液体培养基 培养基特有成分 蔗糖 植物激素 葡萄糖 动物血清 培养结果 完整植物体 细胞株、细胞系 培养目的 快速繁殖、培育无病毒植株 获得细胞或细胞分泌蛋白 1、叙述多莉羊、高产奶牛的克隆过程 2、说出多莉羊和高产奶牛的克隆过程的不同点？ 3、说出体细胞核移植技术的应用前景及存在的问题 学习目标： 二、动物细胞核移植技术和克隆动物 问题1 我们能否利用类似植物组织培养获得完整植物体的方法培养动物细胞，使其发育成一个完整的个体？ 不能，高度分化的植物细胞仍保持着全能性，而动物细胞的全能性会随细胞分化程度的提高逐渐受到限制，分化潜能逐渐变弱。 全能性高低： 植物细胞＞动物细胞  动物细胞分化特点 分化潜能变窄：随着细胞分化程度的提高而逐渐受到限制，分化潜能变窄，这是指整体细胞而言。 细胞核仍具有全能性：细胞核，它含有保持物种遗传性所需的全套基因，而且并没有因细胞分化而丢失基因，因此高度分化细胞的细胞核仍具有全能性 根据动物细胞核仍具有全能性的特点,怎样将动物细胞的全能性表达? 利用动物体细胞核移植技术 （一）概念 动物细胞核移植技术是将动物的一个细胞的细胞核，移入到一个已经 中，使其重组并发育成一个新的胚胎，该胚胎最终发育成完整的动物个体。 利用核移植技术得到的动物称为 去掉细胞核的卵母细胞 克隆动物。 （二）哺乳动物核移植的类型 胚胎细胞核移植 体细胞核移植 细胞分化程度低，恢复全能性 容易 细胞分化程度高，恢复全能性 困难 请看教材P48图2-21 思考： 1.核移植的受体细胞是什么？处在什么时期？ 2.通过什么手段激活受体细胞，构建重组胚胎？ MⅡ中期 卵母细胞 诱导方法：物理或化学方法（电脉冲、钙离子载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）激活受体细胞，完成细胞分裂和发育进程。 （三）体细胞核移植的过程（以高产奶牛为例） （三）体细胞核移植的过程（以高产奶牛为例） 体细胞 培养 取出核 甲牛 乙牛 MⅡ中期卵母细胞 去除核 去核卵母细胞 重组 卵母细胞 核植入 卵裂和发育 重组胚胎 代孕母牛丙 移植 体细胞群 克隆牛 细胞核移植 胚胎移植 物理或化学方法激活 显微操作法 无性生殖 1、体细胞核移植的技术操作过程主要包括核供体细胞和核受体细胞的处理和制备、核移植、构建重组胚胎、胚胎移植等步骤。 2、取MⅡ中期卵母细胞作受体细胞。 3、严格来说新个体有卵母细胞的细胞质所以有两个亲本的性状 归纳: 为什么受体细胞要选择为减数分裂第二次分裂中期（MⅡ）的卵母细胞？ 问题2 因为此时的卵母细胞中的成熟促进因子（MPF）的含量和活性高，有利于成功。 问题3 在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？ 为使核移植的胚胎或动物的遗传物质来自有重要利用价值的动物提供的体细胞，在供体细胞的细胞核移至受体细胞之前，必须将受体细胞核去掉或将其破坏。 问题4 用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，这是为什么？ 培养的动物细胞一般当传代至10～50代左右时，部分细胞核型可能会发生变化，其细胞遗传物质也可能会发生突变，而10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。因此，在体细胞核移植中，为了保证供体细胞正常的遗传基础，通常采用传代10代以内的细胞。 问题5 利用体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？ 克隆动物DNA主要来自于供体细胞核，但其核外还有少量的DNA，即线粒体中的DNA是来自于受体卵母细胞。所以用体细胞核移植方法克隆的动物并不是供核动物完全相同的复制。 （四）体细胞核移植技术的应用前景 1.加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育； 2.保护濒危物种； 3.克隆转基因动物，生产医用蛋白； 4. 作为异种移植的供体。 5.人的核移植胚胎干细胞经诱导分化，形成相应的组织、器官后，可用于组织器官的移植。 （五）体细胞核移植技术存在的问题 1.克隆动物存活率低，遗传缺陷多等； 2.克隆动物食品的安全性问题。