5生物合成调节机理-2翻译例析.ppt

第五章 酶的生物合成及调节机理 主要是RNA和蛋白质的生物合成过程。 第二节 蛋白质的生物合成—翻译 中心法则指出，遗传信息的表达最终是合成出具有特定氨基酸顺序的蛋白质，这种以mRNA上所携带的遗传信息,到多肽链上所携带的遗传信息的传递，就好象以一种语言翻译成另一种语言时的情形相似，所以称以mRNA为模板的蛋白质合成过程为翻译(translation)。 翻译过程十分复杂，需要mRNA、tRNA、rRNA和多种蛋白因子参与。在此过程中mRNA为合成的模板，tRNA为运输氨基酸工具，rRNA和蛋白质构成核糖体，是合成蛋白质的场所，蛋白质合成的方向为N—C端。 蛋白质合成体系 遗 传 密 码 介 绍 三联体密码的破译 缺失或插入核苷酸引起三联体密码的改变 以均聚物为模板指导多肽的合成 以特定的共聚物为模板指导多肽的合成 核糖体结合技术 遗传密码字典 遗传密码的性质 人线粒体中变异的密码子 密码子与反密码子相互作用 密码的摆动性（变偶性）：密码的专一性主要是由第一第二个碱基所决定，tRNA上的反密码子与mRNA密码子配对时，密码子的第一、二位碱基是严格的，第三位碱基可以有一定的变动。Crick称这一为变偶性（wobble）. 反密码子与密码子之间的碱基配对 1966年Crick根据立体化学原理提出： 密码子的使用 64组密码子中，AUG既是氨基酸的密码，又是起始密码；有三组密码不编码任何氨基酸，而是多肽链合成的终止密码子：UAG、UAA、UGA。 （1）原核生物中以AUG为起始密码子，少数为GUG；真核生物中以AUG，终止密码子UAA，UAG，UGA全部被使用，有时连作两个； （2）哺乳动物中对同义密码子使用有很大差异，有的广泛使用，有的有所偏好； （3）大肠杆菌中3’端为C、U的同义密码子，若前两位是A，U，第3位优先用C；但若是C，G，则优先用U 以mRNA为模板，以氨基酸为底物，在核糖体上通过各种tRNA、酶和辅助因子，合成多肽链的过程。 1、氨基酸活化生成氨酰—tRNA（反应式） 2、肽链合成起始（Fig ） 3、肽链的延伸（ Fig ） 4、肽链的终止 (link) 5、蛋白质前体的加工 (link) 1、氨基酸活化生成氨酰-tRNA 密码子与反密码子的配对关系 基因间的校正突变 氨基酸的活化 N-甲酰甲硫氨酰-tRNAiMet的形成 氨酰- tRNA合成酶特点 2、肽链合成的起始 以大肠杆菌为例；在GTP和起始因子initiation factor参与下30S亚基、fMet-tRNAF、mRNA和50S亚基结合。组成起始复合物，5个步骤： （1）30S亚基与起始因子IF3结合； （2）30S亚基与mRNA结合,30S-IF3-mRNA； （3）fMet-tRNAF与IF2及GTP结合fMet-tRNAF-IF2-GTP ； （4）IF1参与下， （3）与（2）结合成30S起始复合物， fMet-tRNAF上反密码子正好与mRNA上起始密码子AUG结合； （5）50S亚基与30S起始复合物结合形成完整70S核糖体； fMet-tRNAF位于70S核糖体“P”位（肽酰基位），而其“A”位空着 肽链合成的起始 3、肽链的延伸 延伸因子elongation factor参与下对应的氨酰-tRNA进入核糖体”A位” 四步骤： （1）延伸因子EF-T与氨酰-tRNA(AA1-tRNA1)及GTP结合生成复合物; （2）AA1-tRNA1进入A位同时释放EF-T,GTP水解生成GDP和Pi; （3）肽基转移酶将P位fMet-tRNAF的fMet转至A位AA1-tRNA1的氨基上,以肽键结合生成肽酰-tRNA(fMet-AA1-tRNA1) （4）在延伸因子EF-G和GTP参与下,mRNA与核糖体相对移动一个密码子距离使原来A位的肽酰移位至P位,A位又成空位,释放出相关因子,然后下一个氨酰-tRNA2进入A位重复(1)~(3)步骤 肽链的延长 肽键的形成 4、肽链的合成终止 当终止密码子移动到核糖体A位时无相应氨酰-tRNA进入，，此时释放因子（release factor)进入A位与终止密码子结合。 肽链合成的终止及释放 Tu\Ts循环 多核糖体与核糖体循环 5、蛋白质的加工修饰 胰岛素原的加工 视频 蛋白质的翻译 1 2 1 2 2 3 2 3 进位 肽键形成 移位 进位 (Tu\Ts) GTP GTP N-端 2 3 5′ 3′ C-端 肽键形成 1 5′ 3′ （EF-G） back （1）释放因子RF1或RF2进入核糖体A位。 （2）多肽链的释放 （3）70S核糖体解离 5? 3? UAG 30S亚基 50S亚基 5? 3? UAG tRNA RF Ts Ts-GDP 合成完毕的肽链