思考 ⑴为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么? 第一步灼烧:消灭接种环上的微生物避免污染培养物; 每次划线前灼烧:为了杀死上一次划线结束后,接种环残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐渐减少,以便得到菌落。 操作结束后灼烧:杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境及感染操作者。 思考 ⑵在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线? 避免接种环温度太高,杀死菌种 ⑶在作第二次及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线? 划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐渐减少,最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 (二)纯化大肠杆菌: 2.常见接种方法: (2)稀释涂布平板法: 将菌液进行一系列的梯度稀释后,分别涂布到固体培养基表面。稀释度足够高时,能培养出单个菌落。 主要用于分离菌种并计数。 涂布器 系列稀释 9ml 稀释液 1ml 9ml 稀释液 1ml 10-1 10-2 9ml 稀释液 9ml 稀释液 9ml 稀释液 9ml 稀释液 1ml 1ml 1ml 1ml 10-3 10-4 10-5 10-6 涂布平板 滴
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