6-2基因工程及其应.pptVIP

1、基因工程的概念、原理、操作水平、优点。 2、基因剪刀是什么？其特点、作用和结果是什么？ 3、黏性末端有什么特点？其碱基可以通过什么连接？ 4、基因针线是什么？与DNA聚合酶的异同是什么？ 5、基因运载体的作用是什么？常用的有哪些？ 6、质粒的实质是什么？主要存在于哪里？ 7、基因工程的操作步骤有哪四步？ 8、简述抗虫棉的培育过程。 (1)细菌的基因之所以能在棉花细胞内表达，产生抗性，其原因是 。 (2)上述过程中，将目的基因导入棉花细胞内使用的方法是 ，目的基因是否插入到受体细胞染色体DNA上，这需要通过检测才能知道，检测采用的最好方法是 。 (3)利用基因工程培育抗虫棉，与诱变和杂交育种相比，具有 和 等优点，但是目前基因工程仍不能取代杂交育种和诱变育种。与基因工程技术相比，杂交育种和诱变育种方法主要具有 的优点。 首只转基因猴诞生，人类未来忧喜参半 　　胰岛素从猪、牛等动物的胰腺中提取，100Kg胰腺只能提取4-5g的胰岛素，其产量之低和价格之高可想而知。 　　将合成的胰岛素基因导入大肠杆菌，每2000L培养液就能产生100g胰岛素！使其价格降低了30%-50%! 　　基因工程做成的“超级细菌”能吞食和分解多种污染环境的物质。 　　通常一种细菌只能分解石油中的一种烃类，用基因工程培育成功的“超级细菌”却能分解石油中的多种烃类化合物。有的还能吞食转化汞、镉等重金属，分解DDT等毒害物质。 浸染 目的性强 克服远缘杂交不亲合 操作简单 所有生物共用一套遗传密码 农杆菌转化法 DNA分子杂交 谢谢同学们！ 循环 变性 退火 延伸 * * * * * * 基因工程及其应用 1、概念：又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。 2、原理：基因重组 3、操作水平：分子水平 4、优势：①定向地改造生物的遗传性状 　　　　 ②打破种的界限 基因的“剪刀”──限制性核酸内切酶 （限制酶） 基因的“针线”──DNA连接酶 基因的运载体 1、特点：一种限切酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定切点切割DNA分子（专一性）； 2、作用：切断外源DNA，对自身DNA不破坏 3、结果： ①错位切----黏性末端 ②平 切----平末端 （一）基因剪刀----限制性核酸内切酶 （限制酶） 大肠杆菌的一种限制酶( EcoR1)能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。 限制酶 限制酶 什么叫黏性末端？ 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 1、作用：通过形成磷酸二酯键，将脱氧核糖和磷酸交替连接而构成的DNA外侧链上的缺口连接起来。 （二）基因针线----DNA连接酶 磷酸二酯键 2、常用：质粒、噬菌体、动植物病毒 （三）基因的运载体 1、作用：将外源基因送入受体细胞 质粒 实质：环状DNA分子 存在：细菌及酵母菌细胞中 质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性作用，但复制只能在宿主细胞内成。 2、常用：质粒、噬菌体、动植物病毒 （三）基因的运载体 1、作用：将外源基因送入受体细胞 质粒 实质：环状DNA分子 存在：细菌及酵母菌细胞中 3、必备条件： ①能在宿主细胞中复制并稳定保存； ②具有多个限制酶的切点 ③具有标记基因（如抗生素的抗性基因） 提取目的基因 1 目的基因与运载体结合 2 将目的基因导入受体细胞 3 目的基因的检测与鉴定 4 （一）提取目的基因 1、目的基因：是人们所需要转移或改造的基因。 如苏云金芽孢杆菌的抗虫基因，还有植物的抗病（抗病毒、抗细菌）基因、种子贮藏蛋白的基因，以及人的胰岛素基因、干扰素基因等。 直接分离基因（用限制性内切酶）人工合成基因 2、目的基因的提取方法 3、一般要使用限制性核酸内切酶 （二）目的基因与运载体结合 1）用一定的限制酶切割质粒，使其出现一个切口，露出黏性末端。 2）用同一种限制酶切断目的基因，使其产生相同的黏性末端。 3）将切下的目的基因片段插入质粒的切口处，再加入适量DNA连接酶，形成了一个重组DNA分子（重组质粒）