高考生物 1-1生物技术的实践课件 教科版选修1.pptVIP

【典例2】 (2012·浙江自选，17)幽门螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下： 请回答下列有关问题。 (1)在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有______，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现________色环带。 (2)下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是________灭菌。 A．高压蒸汽　　　　　　　　　　　　 B．紫外灯照射 C．体积分数为70%酒精浸泡 D．过滤 (3)步骤X表示________。在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液________到培养基平面上。菌液稀释的目的是为了获得________菌落。 (4)在培养时，需将培养皿倒置并放在______中。若不倒置培养，将导致________。 (5)临床上用14C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将14C标记的________分解为NH3和14CO2。 解析　(1)幽门螺杆菌(Hp)含有脲酶，能以尿素为氮源，在加入尿素和酚红指示剂的培养基中培养Hp，由于尿素经脲酶的降解可产生碱性的NH3，NH3能使培养基中的酚红由红黄色变成红色，故菌落周围会出现红色环带。(2)由于尿素加热会分解，对尿素溶液进行灭菌最好用G6玻璃砂漏斗过滤。(3)微生物的分离和培养步骤是：配制培养基→灭菌、倒平板→接种→培养。为获得单菌落，接种操作前应先将菌液稀释，然后将菌液涂布到培养基平面上即可。(4)微生物培养时需将培养皿倒置并放在恒温培养箱中，若不倒置培养，则无法形成单菌落。(5)幽门螺杆菌能将14C标记的尿素分解为NH3和14CO2，故临床上常用14C呼气试验检测人体内幽门螺杆菌的存在。 答案　(1)脲酶　红　(2)D　(3)接种　涂布　单　(4)恒温培养箱　无法形成单菌落　(5)尿素 微生物的分离、计数与鉴定是微生物技术领域的重点内容之一，广泛应用于食品加工，微生物污染测定等行业，具有重要的实践价值，相关内容在近年高考中多有体现，应高度重视。 1．比较选择培养基与鉴别培养基 种类 制备方法 原理 用途 举例 选择培养基 培养基中加入某些化学物质 依据某些微生物对某些物质或环境条件的嗜好、抗性而设计 从众多微生物中分离所需的微生物 加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌 鉴别培养基 培养基中加入某种指示剂或化学药品　 依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中的特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计 鉴别不同种类的微生物　 伊红-美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌 2.分离以尿素为氮源的微生物 (1)分离原理： ①土壤中细菌之所以能分解尿素，是由于它们能合成脲酶，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起催化作用。 ②使用以尿素为唯一氮源的培养基能促进分解尿素的细菌的生长和繁殖；并抑制或阻止其他微生物的生长，从而分离出目的菌。 (2)土样的获得：从有哺乳动物排泄物的地方取得。 (3)实验步骤： 尿素细菌分离“查漏补缺” (1)用琼脂糖代替琼脂配制固体培养基。琼脂是未被纯化的混合物，内含一定量的含氮化合物，不利于以尿素为氮源的细菌的筛选。 (2)培养基中的酸碱指示剂产生颜色变化(变红)，标志着存在脲酶水解尿素的作用，从而证明这一菌株可以以尿素为氮源。红色环状区域的大小代表脲酶活性的强弱和含量的多少。红色区域越大，表明菌株利用尿素的能力越强。 (3)与全营养培养基上的菌落数比较，尿素培养基上只有少数菌落，这一现象表明能利用尿素的细菌在土壤菌群中只占极小部分。 (4)微生物筛选过程中必要的两种对照培养基及其作用 对照组 作用 现象 结论 未接种培养基 有无杂菌污染的判断 未接种的培养皿中无菌落生长 未被杂菌污染 接种的 牛肉膏 蛋白胨 培养基 选择培养基筛选作用的确认 牛肉膏培养基上的菌落数大于选择培养基上的数目 选择培养基具有筛选作用 关键一点　即使使用了选择培养基，所得到的微生物也未必全为“目标微生物”，因此，常需对选择培养基中菌落作进一步鉴定。 【训练4】 (2013·浙江宁波二模)请回答微生物培养和分离的有关问题。 (1)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行________(填“消毒”或“灭菌”)；操作者的双手需要进行清洗和________(填“消毒”或“灭菌”)。若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过________(填“消毒”或“灭菌”)处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。 (2)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_______________。 (3)欲从土壤中分离出能利用尿素的细菌：以________为唯一氮源且加入了_____