基因工程实验课件.pptVIP

基因工程实验 实验目录 实验一 实验计划表 实验二 染色体DNA的提取 实验三 PCR扩增 实验四 凝胶电泳法回收目的DNA及其体外连接 实验五 感受态细胞的制备 实验六 重组质粒的转化 实验七 质粒的提取 实验八 重组质粒的酶切鉴定 实验一 实验计划表 一、实验目的 基因工程（Gene Engineering）又称ＤＮＡ重组技术，把不同生物的ＤＮＡ与载体相连，并导入到受体细胞中去增殖、表达。 基因工程包括切、接、转、增、检五大要素。 凝胶电泳系统、微量移液器、三角瓶、微波炉、铲子、手套 琼脂糖、1×TBE、加样缓冲液 ⑴ 目的基因的获取 　　　基因组总ＤＮＡ提取　　凝胶电泳检测　　 ＰＣＲ扩增目的基因　　 ＰＣＲ产物的电泳检测　　 ＰＣＲ产物纯化　　　获得目的基因ＭＨＣ ⑵ＤＮＡ重组、转化 　　　ＭＨＣ与pMD18-T连接　　DH5a感受态细胞制备　 　 转化、平板涂布、培养 ⑶筛选与鉴定 　　　抗生素抗性筛选　　挑单菌落培养　　提取质粒　　质粒酶切、电泳检测　　 2.微量移液器的使用 将微量移液器按钮轻轻压在第一挡 垂直握持微量移液器，使吸头浸入页面下几毫米，千万别将吸头直接插到液体底部 缓慢、平稳地松开控制按钮，吸上样品液。否则液体进入吸头太快，导致液体倒吸入移液枪内部，或吸入