北京理工大学-邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告.docVIP

邻二氮菲分光光度法测定铁 刘红阳 1120123063 一、实验目的 学习测定微量铁的通用方法； 掌握分光光度法分析的基本操作及数据处理方法； 初步了解分光光度法分析实验条件研究的一般做法。 二、实验原理 一般选择络合物的最大吸收波长为工作波长。控制溶液酸度是显色反应的重要因素。因为多数显色剂是有机弱酸或弱碱，溶液的酸度会直接影响显色剂的理解程度，从而影响显色反应的完全程度及络合物的组成。另一方面，酸度大小也影响着金属离子的存在状态，因此也影响了显色反应的程度。应当确定显色剂加入量的合适范围。不同显色反应的络合物达到稳定所需要的时间不同，且达到稳定后能维持多久也大不相同。大多数显色反应在室温下就能很快完成，但有些反应必须加热才能较快进行。此外，加入试剂的顺序、离子的氧化态、干扰物质的影响等，均需一一加以研究，以便拟定合适的分析方案，使测定既准确，又迅速。本实验通过对铁(Ⅱ)-邻二氮菲显色反应的条件实验，初步了解如何拟定一个分光光度法分析实验的测定条件。 邻二氮菲是测定铁的高灵敏性、高选择性试剂之一，邻二氮菲分光光度法是化工产品中微量铁测定的通用方法。在pH2~9的溶液中，Fe2+和邻二氮菲生成1:3橘红色络合物，lgβ3=21.3(20℃)，ε508=1.1×104L·mol-1·cm-1，其吸收曲线如图一所示；Fe3+亦可以与邻二氮菲生成蓝色络合物，因此，在显色前需用盐酸羟胺溶液将全部的Fe3+还原为Fe2+。反应式如下（和图二）： 2Fe3++2NH2OH===2Fe2++N2↑+2H2O+2H+ 图一 图二 用分光光度法测定物质的含量，一般采用校准曲线法（又称工作曲线法），即配制一系列浓度有小到大的标准溶液，在选定条件下依次测量各标准溶液的吸光度A，在被测物质的一定浓度范围内，溶液的吸光度与其浓度呈线性关系（邻二氮菲测Fe2+，浓度在0~5.0μg·mL-1范围内呈线性关系）。以溶液的浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制出校准曲线。测绘校准曲线一般要配制3~5个浓度递增的标准溶液，测出的吸光度至少要有三个点在一条直线上。作图时，坐标选择要合适，使测量数据的有效数字位数与坐标的读数精度相符合。 测定未知样时，操作条件应与测绘校准曲线时相同。根据测得的吸光度从校准曲线上查出相应的浓度，就可计算出试样中被测物质的含量。通常应以试剂空白溶液为参比溶液，调节仪器的吸光度零点。 三、实验试剂与仪器 试剂：1.0mol·L-1乙酸钠溶液，0.1mol·L-1柠檬酸(H3C6H5O7·H2O)溶液,5.0%盐酸羟胺(NH2OH·HCl)溶液，0.20%邻二氮菲溶液，40.0μg·mL-1标准铁溶液。 仪器：722型分光光度计(配两只1.0cm比色皿)，比色管若干，5mL移液管，洗耳球，10mL量筒，胶头滴管，烧杯，洗瓶，擦镜纸。 四、实验步骤 ⑴ 确定工作波长：移取2.00mL标准铁溶液注入比色管中，加入1.0mL盐酸羟胺溶液，混匀后放置2min。加1.0mL邻二氮菲溶液和2.0mL乙酸钠溶液，加水至25mL标线，摇匀。以水为参比，在不同波长下测量相应的吸光度(从440nm到560nm，间隔10nm测量一次吸光度，其中在500~520nm之内，间隔5nm测量一次)，确定适宜的工作波长（即选取吸光度最大值对应的波长）。 ⑵ 校准曲线的制作：在六支比色管中分别加入0,0.5,1.0,1.5,2.0,2.5 mL标准铁溶液，各加入1.0mL盐酸羟胺溶液，混匀后放置2min。各加入1.0mL邻二氮菲溶液和2.0mL乙酸钠溶液，加水稀释至标线，混匀。以试剂空白为参比，在选定的工作波长下测量各溶液的吸光度。并以铁的浓度[μg·mL-1或μg·(25mL)-1]为横坐标、相应的吸光度为纵坐标，绘制校准曲线。 ⑶ 未知样铁浓度的测定：取2.5mL未知铁样溶液于25mL比色管中，与标准曲线配制标准溶液一样的方法配制测混合液，并测其吸光度。 实验数据记录与处理 ⑴ 确定工作波长 在400~560nm(间隔10nm测量一次)波长下测得相应的吸光度如下表所示： 波长/nm 440 450 460 470 480 490 吸光度A 0.434 0.466 0.502 550 567 576 500 510 520 530 540 550 560 0.594 0.619 0.589 0.479 0.328 0.201 0.126 在500~520nm每隔5nm测量一次，结果如下： 波长/nm 500 505 510 515 52