【创新设计】高中生物 苏教版选修一【配套课件】1.1.1 培养基的配制与无菌操作和接种技术 .pptVIP

接种的概念 在无菌条件下将微生物接入培养基的操作过程叫做接种。 接种方法与接种工具的对应关系 1． 2． 接种方法 接种工具 划线接种(斜面、平板) 接种环 穿刺接种 接种针 涂抹平板 玻璃刮铲 倒平板与涂抹平板法的操作 (1)倒平板操作 3. (2)涂抹平板操作 平板划线法操作步骤及分析说明 4． 序列 操作步骤 分析说明 1 将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红 将接种环灭菌，避免污染菌种 2 在火焰旁冷却接种环，拔开试管棉塞 避免杂菌污染菌种 3 将试管口通过火焰 灼烧灭菌，防止试管口菌体污染培养基 4 将灭过菌的接种环伸入菌种管，先将环部接触斜面顶端 使接种环冷却，避免杀死菌种 5 抽出接种环时，带菌部分不要触及管壁或通过火焰 防止菌种沾于管壁，防止菌种被杀死 6 在培养基斜面上由底部向上轻轻划“S”型曲线但不要将培养基表面划破 初步接种。划破培养基不利于后续的继续划线，长出的菌落不标准 7 将试管口与试管塞通过火焰2～3次，迅速塞紧试管 防止杂菌污染 8 将接过种的试管，放在温箱(37 ℃)中培养24 h 培养细菌，观察菌落 特别提醒 (1)无菌操作是微生物接种技术的关键。 (2)将玻璃刮铲末端浸在盛有体积分数为70%的酒精的烧杯中可起到消毒作用。 (3)倒平板操作中，当平板冷凝后，要将平板倒置。因为平板冷疑后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的温度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发；又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 右图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为12345。下列操作方法正确的是 (　　)。 【巩固3】 A．操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌 B．划线操作须在火焰上进行 C．在5区域中才可以得到所需菌落 D．在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌 解析　本题考查平板划线的操作方法。在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧，接种时划线操作是在火焰边进行。在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培养即可获得所需菌落。 答案　D 下表是某培养基的配方，下列叙述正确的是 (　　)。 【例1】 示例一　培养基的配制 成分 蛋白胨 葡萄糖 K2HPO4 伊红 美蓝 蒸馏水 含量 10 g 10 g 2 g 0.4 g 0.065 g 1 000 mL A．从物理性质看，该培养基属于液体培养基，从用途看 该培养基属于选择培养基 B．培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的 物质是蛋白胨 C．该培养基缺少提供生长因子(特殊营养物质)的物质 D．该培养基调节合适的pH后就可以接种菌种使用 思维导图： 深度剖析　从物理性质看，该培养基中无凝固剂，应属液体培养基；蛋白胨可提供氮源及生长因子；培养基在接种前须经高压蒸汽灭菌。 答案　B 归纳提升　(1)培养基的配制原则 ①目的要明确：配制时应根据微生物的种类、培养目的等确定配制的培养基种类。 ②营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。 ③pH要适宜：各种微生物适宜生长的pH范围不同，如细菌为6.5～7.5，放线菌为7.5～8.5，真菌为5.0～6.0，培养不同微生物所需pH不同。 (2)微生物最常用的碳源是糖类，尤其是葡萄糖；最常利用的氮源是铵盐、硝酸盐。 (3)对异养微生物来说，含C、H、O、N的有机物既是碳源，又是氮源、能源。 (4)有些培养基不需要添加特殊营养物质(生长因子)，生物自己能合成，如大肠杆菌能合成某些维生素，作为特殊营养物质。 下列有关自养型微生物的营养的叙述中，错误的是 (　　)。 A．NaHCO3可提供两类营养物质 B．N2在一般条件下可成为氮源 C．含C、H、O、N的物质可提供碳源、氮源和能源 D．自养型微生物需五类营养物质 解析　只有固氮微生物才能利用N2作氮源。 答案　B 【变式拓展1】 培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是 (　　)。 ①化学消毒　②灼烧灭菌　③干热灭菌　④紫外线消毒 ⑤高压蒸汽灭菌　⑥巴氏消毒法 A．⑤③②①④⑥ B．①②③④⑤⑥ C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤ 思维导图： 【例2】 示例二　无菌操作技术 深度剖析　培养基用高压蒸汽灭菌；培养皿能耐高温，需用干热灭菌；接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果；实验操作者的双手可用化学药剂进行消毒，如用酒精擦试双手；空气可用紫外线消毒；牛奶为不破坏其营养成分可采用巴氏消毒法。 答案　A 温馨提示 (1)无菌操作的几个关键环节 ①配制培养基时须做到彻底灭菌； ②接种过程中接种工具的灭菌； ③接种过程需在无菌区