改良双抗体夹心法检测可溶性抗原.pptVIP

HRP的色原底物系统 与HRP反应后的颜色 加终止液后的颜色 读数波长 特 点 OPD 临苯二胺 492nm 致畸， 但本底好 TMB 四甲基联苯胺 450nm 操作方便， 本底较高 ELISA 数据的处理 根据standard的浓度和对应的OD值计算出线性方程 将所测定样品的OD值代入方程计算出相应的样品的浓度 Protocal 包被：用Coating buffer 1:1000稀释Capture Ab ，100ul/孔，湿盒4℃过夜； 洗板：弃去孔内液体，PBST洗涤，3×3min，控干； 封闭：加1×Assay diluent 200ul/孔，37℃避光孵育2h； 洗板：弃去孔内液体，PBST洗涤，4×3min，控干； 5. 加样：100ul/孔，37℃避光孵育1h ； 6. 洗板：弃去孔内液体，PBST洗涤，4×3min，控干； 7. Biotin-Detection Ab: 用1×Assay diluent 1:1000 稀释detection Ab ，100ul/孔， 37℃避光孵育1h； 8. 洗板：弃去孔内液体，PBST洗涤，4×3min，控干； 9. Avidin-HRP: 用1×Assay diluent 1:250稀释AV-HRP ，100ul/孔， 37℃避光孵育45min； 10. 洗板：弃去孔内液体，PBST洗涤，5×