顶空气相色谱法测定药物中石油醚残留.docVIP

顶空气相色谱法测定药物中石油醚残留 　　摘 要：目的：采用气相色谱法对药物中石油醚的残留量进行检测。方法：以100%二甲基聚硅氧烷为固定液的毛细管柱为色谱柱；柱温为40℃；进样口温度为220℃；检测器温度为250℃；顶空瓶平衡温度为95℃；以DMF为溶剂。结果：石油醚各组分完全分离，专属性、系统适用性、线性关系、方法耐用性良好。结论：此方法操作简便，方法灵敏，可用于药物中石油醚残留的测定。 　　关键词：顶空气相色谱法 石油醚 　　石油醚是药物合成中常用的一种溶剂，常用的为石油醚（60-90℃），它是由低分子烷烃组成的混合物。在ICH指导原则[1]和中国药典2010年版[2]中，将石油醚列为第四类溶剂，要求药品生产企业在使用时提供该类溶剂残留水平的合理性论证报告。然而石油醚（60-90℃）主要成份为正己烷，而正己烷在中国药典2010年版中被列为应限制使用的第二类溶剂，因此对药物中石油醚的残留测定确实有一定的必要性。本文参考有关文献[3，4]制订了本方法测定药物中石油醚（60-90℃）的残留。 　　一、仪器与试药 　　Agilent 7890A气相色谱仪，Agilent 7697A顶空进样器，火焰离子化检测器（FID）；石油醚（60-90℃）：天津市光复精细化工研究所；DMF： 天津市科密欧化学试剂有限公司. 　　二、试验方法与结果 　　1.色谱条件 　　色谱柱：PEG-20M（30m×0.32mm×*0.5μm）；柱温为40℃；进样口温度为220℃；检测器温度为250℃；顶空瓶平衡温度为95℃；平衡时间为45分钟。 　　2.溶液配置 　　空白溶液： N，N-二甲基甲酰胺 　　石油醚贮备溶液：精密称取石油醚（60-90℃）适量，用DMF稀释并制成0. 29mg/ml的溶液。 　　石油醚对照品溶液：精密量取石油醚贮备溶液适量，用DMF稀释并制成0. 029mg/ml的溶液。 　　正己烷对照溶液：精密称取正己烷适量，用DMF稀释并制成0.029mg/ml的溶液。 　　3.方法学考察 　　3.1专属性试验 　　分别取2.2项下溶液各2ml分别置不同顶空瓶中，密封，依法检测。结果：空白溶剂不干扰石油醚测定，石油醚各峰分离度良好且通过与正己烷保留时间比较，确定石油醚的主要成分为正己烷。 　　3.2系统适用性试验 　　精密量取2.2项下石油醚对照品溶液2ml置顶空瓶中，密封；同法配置6份，依法进样。结果：无论是分别以石油醚各单一成份峰面积计算还是以石油醚各成分峰面积之和计算，其相对标准偏差均符合规定，我们认为以石油醚中主要成分的峰面积之和的计算方式不仅更加合理，还能够更准确地表示出待测药物中可能含有的石油醚的残留量，还能够方便计算；因此本法的系统适用性良好。 　　3.3定量限及重复性 　　因为石油醚的主要成分是正己烷，因此我们通过考察石油醚中正己烷的定量限作为石油醚的定量限。将石油醚对照品溶液用DMF逐步稀释，以信噪比S/N=10计算。在设定条件下，石油醚定量限浓度为0.43552μg/ml；定量限重复性的RSD为2.24%。 　　3.4检测限 　　精密量取石油醚定量限溶液3ml置10量瓶中，用DMF稀释至刻度。精密量取2ml置顶空瓶中，密封，依法进样；结果此时信噪比S/N=3，因此石油醚的检测限为0.13066μg/ml。 　　3.5线性关系试验 　　分别精密量取石油醚对照品贮备液0.08、3.0、5.0、7.0、9.0ml，置5个50ml量瓶中，加N，N-二甲基甲酰胺稀释至刻度，摇匀，作为线性关系试验溶液。分别精密量2ml，置顶空瓶中，顶空进样，记录色谱图。以石油醚中正己烷峰面积对浓度作回归曲线，计算回归方程及相关系数。结果：在进样浓度为0.43552～48.996mg/ml范围内，峰面积与浓度线性关系良好。 　　3.6回收率试验 　　取石油醚对照品贮备液适量，分别制成浓度是石油醚对照品溶液浓度的50%、100%、150%的溶液各3份，依法顶空进样；结果：石油醚的平均回收率为98.1%，因此本方法的准确度良好。 　　3.7方法耐用性试验 　　分别适当改变检测器温度、进样口温度、顶空瓶平衡温度、柱温及流速，精密量取石油醚对照品2ml置顶空瓶中，密封，按照各自方法分别顶空进样；并记录色谱图，查看各条件下石油醚中相邻两峰的分离度是否符合要求。结果：各条件下石油醚中相邻峰均能完全分离。 　　三、讨论 　　1.色谱柱的选择 　　采用极性的毛细管柱石油醚各峰分离完全，能够很好的检测它的残留。 　　2.溶剂的选择 　　选用DMF做为溶剂，不干扰石油醚各成分的测定；且各类药物在DMF中的溶解度都较大，因此适用于多种药物中石油醚残留的测定。 　　四、结论 　　石油醚是由低分子烷烃