1酵母菌的形态观察及死活细胞鉴别4学时..docVIP

实验一 酵母菌的形态观察及死活细胞鉴别 酵母菌死亡率原理。标本片上的某一物象第一次看到后如何再次找到它?. 观察酵母菌的形态及出芽生殖方式； . 学习区分酵母菌死活细胞的实验方法； . 掌握酵母菌的一般形态特征及其与细菌的区别。 图1：酵母菌美蓝浸片观察3min（10×40） 图2：酵母菌美蓝浸片观察30min（10×40） 0.1%和0.05%吕氏碱性美蓝溶液：显微镜，擦镜纸，吸水纸，1．美蓝浸片的观察 （1）在载玻片中央加一滴0.1%吕氏碱性美蓝染色液，然后按无菌操作接种环挑取少量酵母菌放在染液中，并用接种环将其混合均匀，酒精灯上灼烧清洗接种环。 注：染液不宜过多或过少，否则，在盖上盖玻片时，菌液会溢出或出现大量气泡。 用接种环将菌体与染液混合时，不要剧烈涂抹，以免破坏细胞。 （2）用镊子取一块盖玻片，先将一边与菌液接触，然后慢慢将盖玻片放下使其盖在菌液上，用吸水纸吸取多余的液体。 注：盖玻片不宜平着放，以免产生气泡。 （3）将制片放置约3min后镜检，先用低倍镜然后用高倍镜观察酵母的形态和出芽情况，并根据颜色来区别死活细胞，绘图。 （4）染色约0.5h后再次观察，注意死细胞数量是否增加。 （5）用0.05%吕氏碱性美蓝染色液重复上述操作。 （6）清洗载玻片，整理实验台。 2．水-碘液浸片的观察(选做) 在载玻片中央滴一滴碘液，然后在其上加3 小滴水，取少许酵母菌苔放在水-碘液中混匀，盖上盖玻片后镜检。 图1：酵母菌美蓝浸片观察3min（×10）图2：酵母菌美蓝浸片观察3min（10×40） 图：酵母菌美蓝浸片观察30min（10×40）图：酵母菌美蓝浸片观察3min（10×0） 图：酵母菌美蓝浸片观察3min（10×0）图：酵母菌美蓝浸片观察30min（10×40） 显微镜的放大倍数目镜放大倍数物镜放大倍数。 物镜倍数（低倍镜10倍，高倍镜40倍，油镜100倍）一、名词解释 1. 假菌丝：酵母生长旺盛时，出芽形成的芽细胞尚未脱离母细胞又长出了新芽，容易形成成串的细胞。如果各细胞之间连接处面积小于细胞直径，形成的这种藕节状的细胞串称为假菌丝。 二、填空题 1. 高倍镜头的数值孔径通常为，放大倍数为。 2. 油镜头的数值孔径通常为，放大倍数为。 3. 低倍镜头的数值孔径通常是，放大倍数为。 4. 使用显微镜低倍镜观察时，聚光器应该，使用显微镜高倍镜观察时，聚光器应该适当。 5. 显微镜的微动螺旋每转一圈升降距离为. 显微镜的光学系统由和组成。 显微镜的机械部分等九部分组成。 . 简单染色的操作程序是．酵母菌通过0.1%美兰染色1~2分钟后，活细胞呈 色，死细胞呈 色； 在其它条件相同的情况下，物镜放大倍数越大，焦距 ，其工作距离 ，所需光量 。 . 用日光灯作光源时通常用反光镜用自然光作光源时通常用反光镜12. 显微镜的倍数越大焦深越调焦应该越。三、选择题对光学显微镜观察效果影响最大的是（ ） A 目镜 B 物镜 C 聚光器 D总放大倍数 目镜头上的K字母表示C ） A.广视野目镜 B.惠更斯目镜 C.补偿目镜. 目镜头上的P字母表示A.平场目镜 B.广视野目镜 C.平场补偿目镜 . 物镜头上的PL字母表示A.正低相差物镜 B.正高相差物镜 C.负高相差物镜。 . 物镜头上的UVL字母表示A.无荧光物镜 B.照相物镜 C.相差物镜。 镜头上标有对C字母的镜头是A.相差调整望远镜 B.摄影目镜 C.相差目镜 7. 物镜头上的APO字母代表A.消色差物镜 B.复消色差物镜 C.半消色差物镜 8．物镜头上的Ach字母表示A.平场物镜 B.超平场物镜 C.消色差物镜 9．物镜头上的“NH”字母表示A.正相差物镜 B.负相差物镜 C.负高相差物镜 0．物镜头上的“0.17”表示A.要求的盖玻片厚度 B.要求的载玻片厚度 C.镜头浸油的深度 1．镜头上标有“NK字母的镜头是A.照相目镜 B.荧光目镜 C.相差目镜 2．目镜头上的“PK”字母表示A.平场目镜 B.补偿目镜 C.平场补偿目镜 3．物镜头上的Splan字母表示A.超平场物镜 B.平场物镜 C.消色差物镜 4．物镜头上的SplanApo表示A.超平场复消色差物镜 B.超平场半消色差物镜 C.超平场物镜 5.物镜头上的Planapo表示A.超平场物镜 B.平场物镜 C.平场复消色差物镜 6．物镜头上的Plan字母表示A.平场物镜 B.消色差物镜 C.超平场物镜 7．目镜头上的W字母表示A.广视野高眼点补偿目镜