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[蛋白质免疫印迹技术
抗体的结构 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. (二)用于免疫的动物 由于动物的遗传性不同,同一抗原对不同动物或同种不同品系动物、或不同个体,产生特异免疫应答的强弱是不同的。因此,进行动物免疫时,必须选择对该抗原敏感的、年轻的健康动物。 常用的实验动物为羊、家兔、豚鼠和鼠等。一般为6个月大小的动物。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量。 如要获得大量的抗体,多采用大动物; 如要是获得直接标记诊断的抗体,则直接采用本动物; 如要获得间接的标记诊断用抗体,则必须用异源动物制备抗体; 如果难以获得的抗原,且抗体的需要量少,则可以采用纯系小鼠制备。 一般实验室采用的抗体,多用兔和羊制备,因动物反应良好,而且能够提供足够数量的血清。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. (三)抗原 抗原是多种多样的,就其化学成分而言,有蛋白质抗原、类脂抗原、多糖类抗原和核酸抗原等。 为了获得较好的抗血清,最好是选用蛋白质抗原。 不同的抗原,其免疫原性的强弱均不相同,这种免疫原性的强弱取决于抗原的分子量、化学活性基团、立体结构等。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. (四)免疫途径 免疫途径有多种多样,如静脉内、腹腔内、肌肉内、皮内、皮下、淋巴结内注射等。 一般常用皮下或背部多点皮内注射,每点注射0.1mL左右。 实验中0.2mL,3-4点注射。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 皮下注射 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. (五)佐剂 应用佐剂的目的是为了提高抗原对机体的免疫原性,从而提高抗体的效价。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 佐剂主要可分为两种:一种本身具有免疫原性,如百日咳杆菌、抗酸杆菌(结核分枝杆菌)以及革兰阴性杆菌等;另一种本身无免疫原性,如氢氧化铝、磷酸钙、矿物油乳剂、表面活性剂等。 目前实践中常应用的佐剂福氏佐剂。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 福氏佐剂(Freund?adjuvant), 通常是由羊毛脂1份、石腊油5份。这是不完全福氏佐剂。 在每毫升不完全佐剂加入1~20mg卡介苗就成为完全佐剂。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. (六)免疫方法 抗原剂量,首次剂量为10~50μg,加强免疫的剂量约为首次剂量的1/4。 首次免疫时抗原与完全佐剂等体积混合。加强免疫时用不
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