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髓核细胞凋亡调控中的MicroRNA-182
邱晓文,贺西京,王 栋,李浩鹏,赵 波(西安交通大学第二附属医院骨科,陕西省西安市 710004)
引用本文:邱晓文,贺西京,王栋,李浩鹏,赵波. 髓核细胞凋亡调控中的MicroRNA-182 [J].中国组织工程研究,2016,20(42): 6296-6301.
DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.42.010 ORCID: 0000-0001-6701-2397(赵波)
文章快速阅读:
文题释义:
MicroRNA:是一类由内源基因编码的长度约为22个核苷酸的非编码单链RNA分子,它们在动植物中参与转录后基因表达调控。到目前为止,在动植物以及病毒中已经发现有28 645个miRNA分子(Release 21: June 2014)。大多数miRNA基因以单拷贝、多拷贝或基因簇(cluster)的形式存在于基因组中。
质粒:是附加到细胞中的非细胞的染色体或核区DNA原有的能够自主复制的较小的DNA分子(即细胞附殖粒、又胞附殖粒)。大部分的质粒虽然都是环状构型,它存在于许多细菌以及酵母菌等生物中,乃至于植物的线粒体等胞器中。然而,1984年在Streptomyces coelicoler(天蓝色链霉菌)等放线菌以及在Borrelia hermsii(赫氏蜱疏螺旋体)等原核生物中,又相继发现线形质粒。
摘要
背景:前期从中发现hsa-miR-182可能与髓核细胞中凋亡相关基因细胞色素C(cytochrome C,Cycs)基因及钙调磷酸酶(calcineurin)的C亚基CnB(PPP3R1)基因有密切联系。
目的:以质粒为载体,将miR-182及细胞色素C和PPP3R1基因转染进髓核细胞系,检测细胞系中凋亡相关基因细胞色素C及PPP3R1的表达量,明确miR-182是否参与髓核细胞凋亡的调控。
方法:miR-182进行生物信息学预测,将其与预测得到的目标基因进行质粒合成并转染髓核细胞,并建立空白对照,最后进行细胞裂解检测目标基因表达情况。
结果与结论:①经检测,miR-182较空白对照组髓核细胞对细胞色素C基因的表达有明显的抑制作用(P 0.05);②与空白对照组比较,miR-182对于PPP3R1基因的表达无抑制作用。③结果表明,miR-182对于髓核细胞凋亡相关基因细胞色素C有明显抑制作用,可能参与髓核细胞凋亡的调控。
关键词:
组织构建;软骨组织工程;髓核细胞;microRNA;细胞色素C;钙调磷酸酶亚基B基因;凋亡
主题词:
microRNA;细胞色素C;细胞凋亡;组织工程
Regulatory function of microRNA-182 in apoptosis of nucleus pulposus cells
Qiu Xiao-wen, He Xi-jing, Wang Dong, Li Hao-peng, Zhao Bo (Department of Orthopedics, Second Affiliated Hospital of Xi’an Jiaotong University, Xi’an 710004, Shaanxi Province, China)
Abstract
BACKGROUND: Previous study has found that hsa-miR-182 is probably related to the apoptosis-related genes such as cytochrome C (Cycs C) and calcineurin subunit CnB (PPP3R1) in nucleus pulposus cells.
OBJECTIVE: To determine whether miR-182 plays a regulatory role in nucleus pulposus cell apoptosis by detecting the relative gene expression levels after transfecting miR-182 with Cycs C and PPP3R1 into nucleus pulposus cells via plasmid delivery.
METHODS: After a bioinformatics prediction about miR-182, miR-182 and target genes were transfected into the nucleus pulposus cells, and a
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