x1-4生物化学与分子生物学技术实践..doc

一、单项选择题 1．带电荷的蛋白质在电场中移动的速度主要取决于 (　　) A．所带的电荷多少 B．蛋白质的分子大小 C．蛋白质相对分子质量 D．蛋白质的分子大小和所带的电荷多少 答案　D 2．下列关于离心沉降的说法中，不正确的是 (　　) A．目标不同，需要控制不同的离心速率 B．能将分子大小、密度不同的蛋白质分离 C．离心时，离心管内的溶液量要相同，但不需要对称放置在离心机内 D．离心后，分子大小、形状不同的蛋白质会分布在不同的沉降层中 解析　离心时，离心管一定要对称放置。 答案　C 3．以下关于猪血红蛋白提纯的描述，不正确的是 (　　) A．洗涤红细胞时，使用生理盐水可防止红细胞破裂 B．猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少 C．血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测 D．在凝胶色谱法分离过程中，血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢 解析　猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少，是提纯血红蛋白的理想材料。提纯血红蛋白分四步：红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液、透析，其中洗涤红细胞时，要用生理盐水反复洗涤，既要将红细胞洗涤干净，又要不破坏红细胞，然后再用蒸馏水和甲苯使红细胞破裂，释放出血红蛋白。分离提纯血红蛋白时用凝胶色谱法，是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质，相对分子质量大的蛋白质移动速度较快；血红蛋白的颜色可用于观察红色区带的移动情况，并据此判断分离效果。故D不正确。 答案　D 4．关于蛋白质提取的叙述中，不正确的是 (　　) A．分离与纯化蛋白质之前首先要用适当的方法使蛋白质释放出来 B．抽提时要依据蛋白质的不同特性选择不同的溶剂 C．蛋白质的粗提取物离心可除去一些小分子杂质 D．蛋白质的粗制品可能是多种蛋白质的混合物 解析　对抽提得到的粗提取物离心可除去固体杂质。 答案　C 5．下列关于血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳的说法中，不正确的是 (　　) A．加滤纸桥时，待滤纸条湿润后，要驱除气泡，以便使滤纸紧贴于支架上 B．浸泡薄膜时要识别出光泽面，并做记号 C．平悬薄膜时，有记号的一面朝上 D．从染色液中取出薄膜后，用滤纸条压平并吸干，再浸入透明液中脱色 解析　薄膜染色后要先放入漂洗液中漂洗直至蛋白质区底色脱净，然后才用透明液脱色。 答案　D 6．下列关于DNA的粗提取实验和血红蛋白的提取实验，叙述正确的是 (　　) A．前者选择鸡血细胞作为材料较好，后者选择哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料较好 B．样品预处理时，前者静置1天处理除去上清液；后者需要加入清水，反复低速短时间离心洗涤，至上清液无黄色 C．在DNA粗提取实验中，往2 mol/L氯化钠溶液中加入蒸馏水析出DNA时，应该缓慢加入，直到出现黏稠物为止 D．洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐等 解析　鸡血细胞有细胞核，适于提取DNA；哺乳动物成熟红细胞无细胞核和众多细胞器，适用于提取血红蛋白。提取血红蛋白的实验中，洗涤红细胞时，不能加清水，应该加入生理盐水，否则细胞提早释放出血红蛋白与杂质混合，加大提取难度。DNA初次析出时，加蒸馏水至黏稠物不再增加为止，洗涤红细胞的目的是去除杂质蛋白，以利于血红蛋白的分离和纯化。 答案　A 7．关于PCR引物的说法中，不正确的是 (　　) A．引物是PCR过程中与模板DNA部分序列互补，并能引导模板DNA的互补链合成的脱氧核苷酸序列 B．引物常根据需要扩增的目标DNA的碱基序列用化学合成的方法获得 C．DNA聚合酶只能使DNA链从引物的3′端开始向引物的5′端延伸 D．引物的3′端必须具有游离的—OH基团 解析　在DNA分子扩增时，DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从3′端延伸DNA链，因此需要引物。当引物与DNA母链结合后，DNA聚合酶就能从引物的3′端开始延伸DNA了。 答案　C 8．如图为DNA变性和复性示意图，下列相关说法正确的是 (　　) A．向右的过程为加热(80～100℃)变性的过程 B．向左的过程是DNA双链迅速制冷复性 C．变性与在生物体内解旋过程的条件、实质都相同 D．图中DNA片段共有4个游离的磷酸基、4个3′端 解析　变性后的DNA在缓慢降温后才会复性；变性与在生物体内解旋过程的条件不同，实质相同；任一DNA片段都有2个游离的磷酸基(5′)和2个3′端。 答案　A 9．下列有关PCR技术的叙述，不正确的是 (　　) A．PCR技术经过变性、复性、延伸3个阶段 B．PCR技术可用于基因诊断、判断亲缘关系等 C．PCR技术需在体内进行 D．PCR技术利用碱基互补配对的原则 解析　PCR一般要经历30多次循环，每次循环可以分为变性、复性和延伸三步。PCR技术可用于基因诊断、