高中生物 工具酶的发现和基因工程的诞生课件 浙教版选修3.pptVIP

转基因生物——定向基因改造设想 : 第一节 工具酶的发现和 基因工程的诞生 * 设想一 让微生物产生出人的胰岛素、干扰素等珍贵的药物 让细菌“吐出”蚕丝 设想二 设想三 经过多年的努力，科学家于20世纪70年代创立了可以定向改造生物的新技术——基因工程。 让普通的棉花植株具有抗虫性 基因工程： 把一种生物的基因转入另一种生物体中，使其产生我们需要的基因产物，或者让它获得新的遗传性状。 若由你负责研究并定向改造普通棉花植株，使其具有抗害虫的特性。你会遇到哪些困难或需要解决的问题？ 1、如何将抗虫基因（目的基因）从某种生物的DNA上切割下来？ 2、如何使抗虫基因（目的基因）转入棉花细胞中并得以表达？ 基因工程培育抗虫棉的简要过程： 苏云金芽孢杆菌 (有抗虫特性) 普通棉花(无抗虫特性) 抗虫基因 与载体DNA拼接 导入 棉花细胞 转基因棉花植株(有抗虫特性) 提取 (含抗虫基因) 培育 1、限制性核酸内切酶——基因的剪刀 2、 DNA连接酶——基因的针线 3、载体——基因的运输工具 基因工程的工具 一. 限制性核酸内切酶——“分子手术刀” 1.来源：主要从细菌等微生物中分离出来 2. 功能：能够识别和切割DNA分子内一小段特殊核苷酸序列的酶。 特点：一种限制酶只能特异性识别一种 特定核苷酸序列；并在特定切点切割。 DNA的分子结构 A C G T C A G T A T 磷酸 脱氧核糖 含氮碱基 磷酸二酯键 氢键 A T 3.结果：把DNA 分子切割成许多不同的DNA片段（单链延伸末端——粘性末端） 是否切割后产生的一定是粘性末端？ 1.被同一种限制酶切断的几个DNA具有相同的粘性末端。 核心要点： 2.限制酶作用一次打开2个磷酸二酯键。 3.限制酶是一类酶,不是一种酶。 特别提醒：DNA解旋酶的作用是打开氢键,与限制酶不同. 思考： 　　要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个粘性末端？ 2个切口，4个粘性末端。 ⒈它不是切成两条单链,而是两条片段⒉ 限制酶切开的不全都是粘性末端,也有可能是平末端  判断：被限制酶切开的DNA两条单链的切口 叫做粘性末端 （X） ------------错在哪？ GAATTCCGTAGAATTCGGATT 尝试写出下列序列受EcoliI限制性核酸内切酶作用后的片段 CTTCATGAATTCCCTAA GAAGTACTTAAGGGATT CTTAAGGCATCTTAAGCCTAA CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG （1） （2） 二. DNA连接酶——“分子缝合针” １、作用： 将具有末端碱基互补的2个DNA片段连接在一起，形成的DNA分子成为重组DNA分子。 你能区别DNA 连接酶和DNA聚合酶吗？ （形成磷酸二酯键） 讨论1：DNA连接酶作用的一定是连来自于同一种限制酶切割产生的粘性末端吗？ G CCTAG GATC + GATC G CCTAG 思考： （１）用DNA连接酶连接两个相同的粘性末端要连接几个磷酸二酯键？ （２）用限制酶切一个特定基因要切断几个磷酸二酯键？ ２个 ４个 1、DNA连接酶连接的键——磷酸二酯键。 核心要点： 2、DNA连接酶无特异性 3、DNA连接酶和DNA聚合酶的异同点 异: DNA连接酶：把两个DNA片段进行连接 DNA聚合酶：将单个核苷酸加到单链 DNA片段上 同：都能催化两个核苷酸之间形成 磷酸二酯键 是否需模板 用途 作用结果 作用过程 作用部位 成分 DNA聚合酶 DNA连接酶 蛋白质 磷酸二酯键 连接DNA片段 将单个脱氧核苷酸连接成长链 重组DNA 新DNA分子 常用于基因工程 常用DNA复制 不需要 需要 三、质粒 ——“分子运输车” 1、概念：能够自主复制的双链环状DNA分子 ，在细菌中以独立于染色体外的方式存在，是一种特殊的遗传物质。 最常用的质粒：大肠杆菌质粒 例1、1972年 美国斯坦福大学 病毒SV40DNA λ噬菌体DNA 同一限制酶 DNA连接酶 重组DNA 世界首次成功的DNA体外重组实验，是第一个人工DNA重组产物。 2、常含有的基因：抗生素抗性基因 （抗性基因、颜色基因、固氮基因） 含四环素抗性基因的质粒 同一限制酶 DNA连接酶 重组DNA（既含四环素抗性基因又含卡那霉素抗性基因的质粒） 含卡那霉素抗性基因的质粒 基因工程发展史上第一个成功的