(精)发酵过程控制.ppt

青霉菌菌丝形态对发酵的影响 51~120 h：菌体处于静止期，大量合成青霉索，菌丝继续变短，细胞中出现空泡，菌丝量逐渐上升。 120h：放罐，菌丝变细碎，细胞中有大量空泡，自溶菌丝增多。 由于青霉素是在青霉菌顶端合成的，代谢好的菌体产生的分枝多，形成的断裂多，合成青霉素的能力强。 * * * * * * 2、影响自溶的因素 NH4+的限制可能是诱导或刺激真菌细胞自溶的外在因素。 菌株间的遗传差异是影响自溶的重要内在因素。 菌龄也是影响自溶的重要内在因素。 氧的限制会引起自溶提前。 第十节 染菌的检查及处理 染菌对发酵的影响 染菌的检查与判断 染菌原因分析 染菌途径及预防 染菌的拯救与处理 一、染菌对发酵的影响 染菌对不同发酵过程的影响 杂菌的种类和性质对发酵过程的影响 染菌时期对发酵过程的影响 染菌程度对发酵的影响 1、染菌对不同发酵过程的影响 不同发酵过程，微生物菌种、培养基及发酵条件、产物性质不同，染菌造成的危害程度不同。 青霉素发酵：绝大多数杂菌都能产生青霉素酶，会使青霉素迅速分解，甚至得不到产物，其危害十分严重。 2、杂菌的种类和性质对发酵过程的影响 污染的杂菌种类和性质对发酵过程影响不同。 污染噬菌体 污染其它杂菌 青霉素发酵： 污染细短产气杆菌比粗大杆菌危害大。 自溶产生大量泡沫，即使添加消泡剂也无法控制逃液，影响发酵过程的通气搅拌。 发酵液发臭、发酸，致使pH下降，使不耐酸的产品破坏。 染芽孢杆菌，由于芽孢耐热，不易杀死，往往一次染菌后会反复染菌。 3、染菌时期对发酵过程的影响 污染时间：是指用无菌检测方法确认染菌的时间，而不是杂菌进入培养液的时间。 污染的菌量多，显现染菌所需的时间就短；污染菌量少，显现染菌的时间就长。 不同染菌时期对发酵产生的影响不同。 种子培养期染菌 发酵前期染菌 发酵中期染菌 发酵后期染菌 二、染菌的检查与判断 染菌的检查 染菌的判断 1、染菌的检查 显微镜检查法（镜检法） 平板划线培养或斜面培养检查法：8h 双层平板培养法：12～20h 肉汤培养法：24h 2、染菌的判断 以酚红肉汤培养和平板培养为主，其它方法为辅。 若连续3个时间的无菌试验均为阳性，即可判断为染菌。 以发酵过程的异常现象判断： 溶解氧水平的异常变化 排气中CO2的异常变化 pH值的异常变化 三、染菌原因分析 发酵染菌的规模分析 不同污染时间分析 染菌的杂菌种类分析 上海第三制药厂染菌原因分析 项目 百分率% 种子带菌 14.15 盘管穿孔 14.20 阀门渗漏 23.30 空气系统有菌 10.0 管理不善 25.80 其它 7.49 原因不明 5.78 第四制药厂链霉素发酵染菌原因分析 项目 百分率% 外界带入杂菌（取样、补料） 8.20 设备穿孔 7.60 空气系统有菌 26.00 停电罐压跌零 1.60 接种 11.00 蒸汽压力不足或蒸汽量不足 0.60 管理问题 7.80 操作违反规程 1.60 种子带菌 0.60 原因不明 35.00 1、发酵染菌的规模分析 大批量发酵罐染菌 部分发酵罐染菌 个别发酵罐连续染菌 种子带菌 培养基灭菌不彻底 罐有渗漏 分过滤器失效 发酵前期：种子带菌或连消系统灭菌不彻底； 发酵后期：中间补料染菌，如补料液带菌、补料管道渗漏。 发酵前期：