大黄的提取分离..docxVIP

大黄的提取分离实验报告背景和目的大黄，又名黄良、火参、将军等，为我国传统常用中药材。大黄(Radixe RhiZomaRhei)为寥科植物掌叶大黄 (RheumPalmatumL)，唐古特大黄(Rheum tangutieumMaxim.exBal勺或药用大黄 (RheumoffieinaleBaill)的干燥根和根茎。掌叶大黄和唐古特大黄药材称北大黄，主产于青海、甘肃等地。药用大黄药材称南大黄，主产于四川。于秋末茎叶枯萎或次春发芽前采挖。除去须根，刮去外皮切块干燥，生用，或酒炒，酒蒸，炒炭用。味苦、性寒。归脾、胃、大肠、肝、心包经。1.1天然产物提取、分离和纯化技术概述植物的化学成分比较复杂，种类很多，因此在着手研究一个植物的有效成分时，首先要大致知道有哪些类型的化学成分，这就需要对各类化学成分的进行简单的定性预试验。通常先用几种不同极性的溶剂分别进行提取，进行生物活性筛选，确定哪一个溶剂提取部位有效后，再对该部位进行各类化学成分的预实验。另外在植物资源化学研究工作中，常常根据工作需要，定向的寻求某类化学成分，这就要进行某类化学成分的单项预实验。根据预实验的结果，判断可能含有哪些类型的化学成分，然后按照所含化学成分的性质，设计有效成分分离的具体方法。通常将植物分别用石油醚、95%乙醇和水提取。这样便可以把绝大部分植物成分提取出来，假使我们不着重研究挥发油，一般经过酒精和水两种溶剂的提取就可以进行预实验。预实验往往只能提供初步的线索。1.1.1.水提液取植物粉末5g，加50mL蒸馏水，在50-60℃的水浴上加热约1小时后过滤，此滤液即可在试管及滤纸上作糖、多糖、有机酸、皂苷、苷类、酚类、鞣质、氨基酸、生物碱等项的预试验。1.1.2.酒精提取液取植物粉末5g，加50mL95%的酒精，在水浴上加热回流约1小时后过滤，滤液即可进行酚类、鞣质、有机酸等项的预实验。其后将滤液浓缩至浆状，置于研钵中，用少量5%盐酸溶解，取盐酸水溶液进行生物碱的预实验。原来的糖浆加以少量的乙醇溶解，其溶液可以进行黄酮体、蒽醌、酚类、苷类、有机酸、香豆素、萜类、甾体化合物等项的预实验。若被试植物为树叶，其中含有很多叶绿素，应尽量先将叶绿素除去，才不致妨碍预实验进行。其方法如下:将植物用95%的乙醇热回流后的浸出液加入适量的水，使95%的乙醇稀释成70%，摇匀后倒入分液漏斗，再加入等体积的石油醚或汽油进行萃取，叶绿素转移到上层的石油醚溶液中，分出下层70%乙醇提取液，减压抽干得糖浆状物质，再做上述预实验。1.1.3.石油醚提取液取植物粉末1g，加10mL石油醚(沸程60-90℃)，放置2-3个小时，过滤，滤液放在表面皿上，让石油醚挥发掉，用残留物进行萜类、甾体、脂肪等项的检查。如何着手有效成分的分离呢?一般有下面两种情况:第一，对有效成分一无所知。另一种就是从植物中提取已知的化学结构类者。两种情况不同，考虑其提取分离方法也不同。对于第一种情况，经不同溶剂提取，以确定有效部位，再逐步细分，追踪有效成分最集中的部位，最后分得有效的单体。通常可以采取由低极性到高极性的分别提取，将药粉按以下次序提取，(1)石油醚或苯提取脂溶性大的化合物，如油脂和蜡、叶绿素、精油及甾体、三萜等中性物质;(2)乙醚提取树脂及一些极性基团少的化合物，如甾体，某些生物碱、有机酸、黄酮体及香豆素苷元等;(3)氯仿及乙酸乙酯提取生物碱及许多中性成分;(4)丙酮、乙醇或甲醇(提取极性化合物，如生物碱的盐类)；(5)水提取水溶性化合物，如氨基酸、糖类等。进一步还可以分为冷水、热水、酸水、碱水等步骤。这样除纤维素等不溶物以外，植物中各类成分都能被提取出来。在确定哪一个部位有效后，再进一步分离。也可以将植物先用水或酒精提取，所得总提取物拌以硅胶或硅藻土等使成粉末后，再按上述次序逐步分离。1.2中药蒽醌类成分的提取分离不同中草药所含蒽醌化合物的结构各不相同，而且游离蒽醌和蒽醌苷的极性溶解性差别较大，因此提取分离方法各异，但多采用有机溶剂提取法。1.2.1 游离蒽醌的提取一般游离蒽醌化合物的极性较小，可用极性较小的有机溶剂如乙醇、乙醚、苯、氯仿等提取。如果提取的是带游离酚羟基的蒽醌化合物，也可以选用碱提取－酸沉淀法，即酚羟基与碱成盐而溶于碱水溶液中，酸化后酚羟基被游离而又沉淀出来。值得注意的是，一般羟基蒽醌类衍生物及其相应的苷类在植物体内多通过酚羟基或羧基结合成镁、钾、钠、钙盐形式，在提取之前需加酸酸化使之全部处于游离状态。也可以先用乙醇提取，减压浓缩后残渣用与水不相溶的有机溶剂(如氯仿、乙醚) 反复萃取，游离蒽醌将转溶于有机溶剂中，蒽醌苷仍留在水溶液中[1]。1.2.2 游离羟基蒽醌的分离羟基蒽醌是中草药蒽醌类化合物最重要的结构类型。由于羟基蒽醌中酚羟基的位置和数目不同，分子的酸性强弱也不同，据此可酌