本科毕业答辩PPT解析.ppt

★结果 材料培养40天后，在MS培养基上未形成愈伤组织及胚状体；在附加不同浓度麦草畏的培养基上，都能诱导出愈伤组织和胚状体，其中1mg/L麦草畏的效果最佳，愈伤率为94.34%，胚状体发生率为56.60%；在添加0.5mg/L 2,4-D的培养基上愈伤组织和胚状体发生率均为100%；在添加0.5 mg/L麦草畏和0.5 mg/L 2,4-D的混合培养基上，愈伤组织和胚状体发生率分别为95%,80%。 ★结论 麦草畏可以诱导西洋参成熟种胚形成愈伤组织和胚状体，其中1mg/L麦草畏的诱导效果最佳，但是效果不及2,4-D，在与2,4-D混合使用时对比2,4-D单独使用的效果，也有所降低。 * 学生姓名：胡云杰 专业班级：生科1102班 指导教师：曹小勇 2015届学士学位论文答辩报告 材料与方法 摘要 一 二 引言 结果与分析 讨论 三 四 五 摘要 1 ★目的 本研究以西洋参成熟种胚为材料，评价麦草畏对体细胞胚胎发生的影响，确定麦草畏在西洋参体细胞胚胎发生中的作用，为西洋参快繁积累相关资料。 ★方法 以MS培养基为基础培养基，附加(0.05-2)mg/L麦草畏，0.5mg/L 2,4-D以及0.5mg/L2,4-D+0.5mg/L麦草畏组成八组培养基，对西洋参成熟种胚进行离体培养。 西洋参（American ginseng）又名花旗参、美国参，系五加科人参属多年生草本植物，原产于美国和加拿大。它含有多种生理活性物质，如西洋参皂苷、多糖、黄酮类、挥发油、微量元素等，其中属西洋参皂苷的生理活性最为显著。西洋参还具有镇静镇惊、安神促智、抗心律失常、抗休克、保护心肌、防血管硬塞、降血脂、增强机体免疫功能、抗应激、抗肿瘤、保肝的药理作用。我国自1975年10月开始有计划地引种西洋参，目前已形成了四大生态气候栽培区：东北栽培区、华北栽培区、华中栽培区和康滇栽培区。隶属于华中栽培区的陕西汉中地区从1978年引种栽培，获得成功。西洋参生长缓慢,对生长环境要求严格，栽培技术复杂，存在种胚后熟现象，在自然状态下需要长达20-22个月才能打破休眠，常规育种方法很难满足生产上的需求。到目前为止人们在西洋参的组织培养及体细胞胚胎发生方面已经做了较为深入和系统的研究，但至今尚未确立稳定的西洋参快速繁殖体系。如果与常规育种方法相结合，通过离体培养技术，建立体细胞胚胎发生的无性繁殖系，在细胞和组织水平上进行抗病等抗性育种，就可以缩短育种年限，加快育种进程。 引言 2 材料与方法 3 3.1材料 本实验的研究材料为西洋参成熟种胚。于2014年11月初，经留坝县科技局中药办协助，从陕西省汉中市留坝县西洋参种植基地购得。经过沙藏层积处理，大部分种子已经出现裂口。 SW-CJ-IF超净工作台(苏州安泰空气技术有限公司)、YXQ-IL-50高压蒸汽灭菌锅（上海博迅实业有限公司医疗设备厂）、SR-1607C型电磁炉（尚明堂电器有限公司）、FA-2004N型电子天平、Nikon SM2800体视显微镜、Nikon E600显微镜、SONYdsc-h3数码相机、培养架、冷藏冷冻箱等。 酒精灯、锥形瓶、容量瓶、量筒、烧杯、玻璃棒、移液管、胶头滴管、pH试纸、封口膜、广口瓶、镊子、解剖刀、解剖针、培养皿、陶瓷杯、称量瓶、滤纸等。 琼脂、 蔗糖、2,4-D、麦草畏、有机物、Fe盐、大量元素、微量元素、纯净水、NaOH（1.0mol/L）、HCl（1.0mol/L）、0.1%的升汞溶液、75%的酒精等 3.2实验仪器、用具及试剂 3.3方法 3.3.1种子消毒 在沙藏的容器中选取饱满已经裂口的种子，剥去种皮后，取实验材料置于纱网袋用洗涤剂清洗，自来水流水冲洗2个小时。带入超净工作台，75%酒精处理10s，再用0.1%升汞处理8min，进行表面灭菌，然后用无菌水漂洗4次，快速分装到无菌培养皿中。 3.3.2培养基 本实验以MS培养基为基本培养基, 添加3％蔗糖、0.6％琼脂，附加不同种类的植物激素（表1.1），pH值为5.8，在121.0℃、1.1 kg/cm2的高温高压下灭菌20min。 3.3.3接种 将上述准备好的种子切取其种胚，分别接种到八种培养基上，每瓶接种3-4个外植体。置于培养室中培养。 3.3.4培养条件 温度：25±1℃；光培养：光照强度1000～1500Lux，16h/d。 3.3.5观察与记录 定期观察，并