微生物第六七章总结..docxVIP

微生物的生长和控制第一节：测定生长繁殖的方法一.测生长量(一)直接法：有粗放的测体积法和精确的称干重法。(二)间接法：1. 比浊法2. 生理指标法二.计繁殖数(一)直接法：指用计数板(例如血球计数板)在光学显微镜下直接观察细胞并进行计数的方法。此法十分常用,但得到的数目是包括死细胞在内的总菌数。可以采用特殊的染色法计算活细胞。(二)间接法：1. 平板菌落计数法：可用浇注平板或涂布平板或滚管法等方法进行。2. 厌氧菌的菌落计数法：亨盖特滚管培养法。第二节 微生物的生长规律一.单细胞微生物的典型生长曲线它只适合单细胞微生物如细菌和酵母菌,非典型的丝状菌生长曲线缺乏指数生长期, 与此期相当的只是培养时间与菌丝体干重的立方根成直线关系的一段快速生长时期。根据微生物的生长速率常数, 即每小时分裂次数(的不同, 一般可把典型生长曲线粗分为延滞期、指数期、稳定期和衰亡期等4个时期。(一)延滞期：延滞期又称停滞期、调整期或适应期。影响延滞期长短的因素：菌种类型，接种龄，接种量，培养基成分。(二)指数期：指数期又称对数期在指数期中,有 3 个重要参数,其相互关系及计算方法在书P155影响对数期的因素：菌种，营养成分，营养物质浓度，培养温度(三)稳定期：细胞内开始积聚糖原、异染颗粒和脂肪等内含物; 芽孢杆菌一般在这时开始形成芽孢;在这时开始以初生代谢物作前体,合成抗生素等对人类有用的各种次生代谢物。稳定期到来的原因是:①营养物尤其是生长限制因子的耗尽;②营养物的比例失调;③有害代谢产物的累积;④物理化学条件越来越不适宜等等。(四)衰亡期：有的微生物在这期会进一步合成或释放对人类有益的抗生素等次生代谢物;而在芽孢杆菌中, 往往在此期释放芽孢;等等。第三节 影响微生物生长的主要因素其中最主要的温度、pH和氧气。一.温度：生长温度三基点:最低生长温度、最适生长温度和最高生长温度。在不同温度下，微生物的代谢产物可能会发生改变。二.PH：除不同种类微生物有其最适生长PH外, 即使同一种微生物在其不同的生长阶段和不同的生理、生化过程, 也有不同的最适PH要求。三.氧气：按照微生物与氧的关系,可把它们粗分成好氧微生物和厌氧微生物两大类。细分为专性好氧菌，兼性厌氧菌，微好氧菌，耐氧菌和厌氧菌。关于厌氧菌不能存活于氧气环境中的解释，现在普遍认为是因为厌氧菌中不存在过氧化氢酶和SOD（超氧化物歧化酶）第四节 微生物培养法概论一.实验室培养法(一)固体培养法1.好氧菌的固体培养：主要用试管斜面、培养皿琼脂平板。2.厌氧菌的固体培养：高层琼脂柱，厌氧培养皿，亨盖特滚管技术(二)液体培养法1. 好氧菌的液体培养：(1)试管液体培养; (2)三角瓶浅层液体培养; (3)摇瓶培养第五节 有害微生物的控制灭菌:采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措 施,称为灭菌.消毒: 是一种采用较温和的理化因素,仅杀死物体表面或内部一部分对人体或动、植物有害的病原菌, 而对被消毒的对象基本无害的措施。防腐: 防腐就是利用某种理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖, 即通过制菌作用防止食品、生物制品等对象发生霉腐的措施。例如：低温，缺氧，干燥，高渗，高酸，高醇，防腐剂。一.物理灭菌因素的代表——高温1.干热灭菌法把金属器械或洗净的玻璃器皿放入电热烘箱内, 在150～170℃下维持1～2 h后, 可达到彻底灭菌(包括细菌的芽孢)的目的。2.湿热灭菌法(1)常压法①巴氏消毒法：此法可杀灭物料中的无芽孢病原菌(如牛奶中的结核分枝杆菌或沙门氏 菌) , 又不影响其原有风味。具体方法可分两类: 第一类是经典的低温维持法(LTH) ,例如用于牛奶消毒只要在63℃下维持30 min即可; 第二类是较现代的高温瞬时法（HTST）,用此法作牛奶消毒时只要在72℃下保持15 s。③间歇灭菌法：适用于不耐热培养基的灭菌，将待灭菌的培养基放在80～100℃下蒸煮 15～60min,以杀灭其中所有的微生物营养体, 然后放至室温或 37℃下保温过夜, 诱使其中残存的芽孢发芽,第二天再以同法蒸煮和保温过夜, 如此连续重复 3 天即可在较低的灭菌温度下同样达到彻底灭菌的良好效果。(2)加压法①常规加压蒸气灭菌法：一般称作“高压蒸气灭菌法”，一般要求为121℃，时间维持15-20min②连续加压蒸气灭菌法:在发酵行业里也称“连消法”。此法仅用于大型发酵厂的大批培养基灭菌。利用温度杀菌时几个关键的数值：①D值是指在一定的致死温度下，90％的活菌被杀死所需的时间（min ),即为D值。②Z值是指如果在加热致时间曲线中，加热时间缩短90％，所需升高的温度，这所需升高的温度即为z值，或者说杀菌时间变化10倍，相应的温度变化值。影响加压蒸气灭菌效果的因素：1. 灭菌物体含菌量 2. 灭菌锅内空气排除程度3