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探讨中药复方肤敏膏促进皮肤创面愈合的作用及机制
探讨中药复方肤敏膏促进皮肤创面愈合的作用及机制 摘要:目的 探讨中药复方肤敏膏促进皮肤创面愈合的作用及机制。 方法以兔背部皮肤全层切除伤为模型,于术后切取创面皮肤及组织制成切片,计数巨噬细胞、成纤维细胞;测定肉芽组织厚度;测定皮肤中羟脯氨酸含量;记录创面愈合率、创面愈合时间。结果肤敏膏可以促进创面巨噬细胞、成纤维细胞的增殖(P 关键词: 中药复方;肤敏膏;皮肤损伤; 愈合
中药复方肤敏膏系云南省名中医李庆生教授在长期临床实践中总结出的治疗过敏性皮肤病的有效验方,由苦参、防风、莲子等组成。据临床观察,肤敏膏对多种皮肤损伤的修复有突出作用,其剂型为膏剂可供患者内服外用,促进损伤的修复,也为中药复方在皮肤创伤修复领域的运用提供了参考。由此,我们对肤敏膏促进皮肤创面愈合作用进行了动物实验观察。现报道如下。
1 器材
1.1 动物
普通级实验兔,1.8~2.5 kg,雌雄各半,动物许可证号:SCXK(滇 XX-0007)。
1.2 药品与试剂
肤敏膏由云南省药物研究所提供。重组人表皮细胞生长因子(rhEGF):南海朗肽生物制药有限公司分装,批号050425;康复新液,湖南中南科伦药业有限公司产品,批号XX0325;羟辅氨酸、考马斯亮兰测定试剂盒,由南京建成生物工程研究所提供,批号XX0812,XX0806.
1.3 仪器
紫外分光光度计,UV2000型,尤尼柯(上海)仪器有限公司产品;DY89—Ⅱ型电动匀浆机,宁波新芝生物科技有限公司产品;XSP-18A型生物显微镜,江南光学仪器厂生产;Motic 数码显微镜B1配合Motic Images Plus 2.0ML 软件。
1.4 数据处理
计量资料以±s表示;多组间样本均数比较用方差分析,方差不齐者做相应变换。实验数据用SPSS11.0统计分析软件处理。
2 方法与结果
2.1 方法
2.1.1 动物的处理[1,2]
于实验前1天,将兔背部脱毛,暴露面积约为12 cm×13 cm。在脊柱旁开1.5 cm处,避开前面肩胛骨和后面髂骨,切除全层皮肤至浅筋膜组织,由前至后做4个直径约为2 cm的创面。术后彻底止血并用凡士林油纱覆盖,无菌纱布包扎,宽绷带固定。将动物随机分成5组,单笼饲养。
2.1.2 用药方法
按照人临床给药量的1,3倍和动物体表面积折算, 肤敏膏设为高、低剂量组,灌胃给药并用灭菌后的药膏外涂伤口,1次/d至创面愈合;阳性对照组1 外涂1 000 u/ml rhEGF溶液(将rhEGF冻干粉溶于0.9%无菌生理盐水中)10μg/创面,1次/d至创面愈合;阳性对照组2灌胃并外喷康复新液1次/d;模型组灌胃及外涂灭菌生理盐水。
2.1.3 指标测定[3~5]
术后3,5,7,10 d切取皮肤全层及皮下组织,制成石蜡切片,染色,光镜下观察并计数巨噬细胞数、成纤维细胞数,测量肉芽组织厚度;5,7,10,14 d测定创面皮肤组织中的羟脯氨酸含量;4,6,10,14 d计算创面愈合率(数据均为测量二维直径所得);最后记录创面愈合时间。
2.2 结果见表1~6。表1 对成纤维细胞数量的影响(略)表2 对巨噬细胞数量的影响(略)表3 对肉芽组织厚度的影响(略)表4 对组织羟脯氨酸含量的影响(略)表5 对创面愈合率的影响(略)表6 对兔背部皮肤全层缺损伤创面愈合时间的影响(略)
从表1可以看出:肤敏膏高、低剂量组均可显著促进成纤维细胞的增殖,且两组在第7 d和第10 d差异有显著性意义(P [2]张凤春,陈云峰,胡奇芬,等.地龙促进大白兔背部创伤伤口收缩的实验研究[J].中国中药杂志,1998,23(9):560.
[3]毕国华.碱性成纤维细胞生长因子促进皮肤创面愈合的动物实验研究[J].黑龙江医学,XX,27(4):273.
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[5]李斌.祛瘀生肌法 对皮肤实验性创面修复的组织形态变化的影响[J].中医药学刊,XX,21(12):2016.
[6]屈纪富,程天民,郝 利.参与皮肤伤口愈合的细胞及其作用的研究进展[J].现代康复,2001,5(12):74.
[7]Cook H,Davies KJ,Hurding KG, et al. Defective extra cellular matrix reorganization by chronic wound fibroblasts is associated with alterations in TIMP-1,TIMP-2,and MMP-2 activity[J].InvestDermatol,2000,115(2):225.
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