【创新设计】2014高生物二轮专题突破课件：第16讲 酶的应用和生物技术在其他方面的应用(44张ppt)【创新设计】2014高考.pptVIP

(4)DNA的析出：向处理后的滤液中加入与滤液体积相等的、冷却的酒精溶液(体积分数为95%)，静置2～3 min，溶液中会出现白色丝状物，用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物。 (5)DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成 。 蓝色 2．比较下表中细胞内DNA复制与PCR技术的不同 项目 DNA复制 PCR技术 场所 能量 酶 是否有转录 引物 温度 特点 循环次数 细胞内 细胞外 ATP提供能量 不需ATP提供能量 解旋酶、DNA聚合酶 耐高温的TaqDNA聚合酶 伴有转录，产生引物 无转录，需加入两种引物 RNA DNA或RNA 体内温和条件 高温 边解旋边复制， 半保留复制 体外迅速扩增 受生物体自身控制 30多次 3.蛋白质的提取和分离 步骤 操作 样品 处理 通过红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液等操作收集到血红蛋白溶液 粗分离 通过透析法去除血红蛋白溶液中相对分子质量较小的______ 纯化 通过凝胶色谱法分离相对分子质量不同的_______ 纯度 鉴定 判断纯化的蛋白质是否达到要求 杂质 蛋白质 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 特别提醒　(1)凝胶色谱柱的直径大小不影响分离效果，但直径过大造成洗脱液体积大，样品稀释度大；凝胶色谱柱的高度与分离度有关。 (2)红细胞洗涤过程中，洗涤三次后，上清液仍有黄色，可增加洗涤次数，否则无法除去血浆蛋白；离心时转速要低，时间要短，否则白细胞等会一同沉淀，达不到分离效果。 (3)血红蛋白释放过程中，蒸馏水的作用是涨破红细胞，甲苯的作用主要是溶解细胞膜。 【典例3】 多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。请回答下列有关PCR技术的基本原理及应用问题。 (1)DNA的两条链是反向平行的，通常将________的末端称为5′端，当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNA聚合酶就能从引物的________开始延伸DNA链。 (2)PCR利用了DNA的热变性原理解决了打开DNA双链的问题，但又导致了DNA聚合酶失活的新问题。到20世纪80年代，科学家从一种Taq细菌中分离到________，它的发现和应用解决了上述问题；要将Taq细菌从其他普通的微生物中分离出来，所用的培养基叫________。 (3)PCR的每次循环可以分为________三步。假设在PCR反应中，只有一个DNA片段作为模板，请计算在5次循环后，反应物中大约有________个这样的DNA片段。 (4)请用简图表示出一个DNA片段PCR反应中第二轮的产物。 (5)简述PCR技术的主要应用。 ________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________(要求3项以上)。 解析　(1)DNA聚合酶工作时必须要有一个引物，它只能把新的核苷酸加到已经存在的核酸的3′羟基上，与DNA母链结合的RNA引物就提供这个羟基。 (2)因PCR利用了DNA的热变性原理解决了打开DNA双链的问题，所以用于催化DNA复制过程的DNA聚合酶要具有耐高温的特性。用选择培养基可将Taq细菌从其他普通的微生物中分离出来。 (3)DNA复制的两条链均作为模板，进行半保留复制，所以复制5次后得到的子代DNA分子数为25＝32个。 (4)新合成的DNA链带有引物，而最初的模板DNA的两条链不带有引物。 (5)PCR技术可以对DNA分子进行扩增，所以可用于遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定等方面。 答案　(1)磷酸基团　3′端　(2)耐高温的TaqDNA聚合酶　选择培养基　(3)变性、复性和延伸　32 (4) (5)遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定 【应用2】 (2012·浙江联考)下列有关“血红蛋白提取和分离”的相关叙述中，正确的是 (　　)。 A．用蒸馏水进行红细胞的洗涤，其目的是去除细胞表面杂 蛋白 B．将血红蛋白溶液进行透析，其目的是去除相对分子质量 较大的杂质 C．血红蛋白释放时加入有机溶剂，其目的是使血红蛋白溶 于有机溶剂 D．整个过程不断用磷酸缓冲液处理，是为了维持血红蛋白 的结构 解析　红细胞的洗涤用的是生理盐水．其目的是去除