成都大学护理药理学实验指导1..doc

成都大学护理药理学实验指导 实验 1 药物半数致死量（ LD 50 ） ）的测定 【目的 】掌握 LD 50 测定方法及计算过程。 【原理】 将一定浓度和一定体积的药物，按一定比例灌胃给予小鼠，观察 7 日，记录不同 剂 量小鼠的死亡情况，计算半数致死量，以确定药物急性毒性。 【器材】 鼠笼、烧杯、 1ml 注射器等。 【药品】 普鲁卡因溶液（ 5 个剂量） 【动物】 小鼠 【方法 】 ⒈ 预试验摸实验剂量范围，找出引起 0 ～ 100% 的估计致死量。 ⒉ 正式试验 ⑴ 取小鼠 50 只，体重 20 ± 2g ， ♀♂ 各半，随机分为 5 组， 10 只 / 组。 ⑵ 剂量按等比级数增减，相邻两剂量比值 1:0.6 ～ 0.9 ，设 4 ～ 5 个剂量组。 ⑶ 给药普鲁卡因溶液， ip 。 5 个剂量组。 ⑷ 统计按改良寇氏法公式进行计算。 LD 50 =log -1 [ X m- i （ Σ P -0.5 ） ] ( 公式 1) X m ：最大剂量组剂量对数值 i ：相邻两组剂量高剂量与低剂量之比的对数 ( 相邻两组对数剂量的差值 ) P ：各组动物死亡率，用小数表示（如果死亡率为 80% 应写成 0.80 ） Σ P ：各组动物死亡率之总和 n ：每组动物数 LD 50 的 95% 可信限 =log -1 （ X 50 ± 1.96 S x 50 ） ( 公式 2 ) LD 50 的平均可信限 =LD 50 ± (LD 50 的 95% 可信限的高限 - 低限 )/2 ( 公式 3 ) 【结果 】填入下表。 表 各组小鼠用药、死亡情况及有关计算 【注意 】 ⒈ 预试验要摸准药物引起 0 和 100% 死亡率剂量的所在范围。 ⒉ 正式试验时各剂量按等比级数分组，应避免最大剂量组的死亡小于 80% ，最小剂量组死 亡率大于 20% ，否则改用其他方法计算。 ⒊ 室温： 20 ℃ 为宜。 ⒋ 认真观察中毒症状情况。 【思考题 】 ⒈ 半数致死量（ LD 50 ）测定的目的意义如何？ ⒉ 半数致死量（ LD 50 ）常用的计算方法有哪些？ 实验 2 药物血浆浓度半衰期测定 一、比色法测定水杨酸钠的半衰期 【目的】比色法测定水杨酸的半衰期。掌握药物血浆半衰期（ t 1/2 ）的测定方法 计算血浆半衰期（ t 1/2 ） 【原理】水杨酸根与铁离子起反应，形成一种紫色络合物，根据紫色络合物的颜色进行比 色 得光密度，将光密度代入公式计算得半衰期。 【器材】试管（ 10ml × 6 ）、离心管（ 10ml × 3 ）、刻度吸管（ 10ml × 4 ）、注射器（ 5ml × 2 ）、 721 型分光光度计、离心机、吸管架、酒精棉球、干棉花、竹签。 【药品】 10% 水杨酸钠溶液、 10% 三氯醋酸溶液、 10% 三氯化铁溶液、 0.5% 肝素溶液。 【动物】家兔 【方法】 ⒈ 取兔一只，称体重，用经 0.5% 肝素湿润过的注射器从兔心取血 2ml （作对照血样），然后 从耳静脉注入 10% 水杨酸纳溶液 1.5m/kg(150mg/kg) 。 ⒉ 注射药后５分钟和 35 分钟再从心脏取血２ ml ，将上述三次抽的血分别放入三支预先装有 7ml 三氯醋酸的离心管搅拌离心（ 1500 转 / 分） 5 分钟，使血浆蛋白沉淀。 ⒊ 准确吸取上清液各 6ml 分别置入试管内，每管加三氯化铁溶液 0.6ml （或 12 滴）摇匀后 即可显色。 ⒋ 以药前管为对照，在分光光度计上，用波长 510nm,1cm 光径比色皿进行比色，读给药后 两管上清液的光密度（ x1 、 x2 ）。 ⒌ 根据下列公式求半衰期 t = 1/2 t= log0.301 .t/ log x 1- log x 2 (x1 、 x2 为药后两次血浓度的光密度， t 为两次取血间隔时间 ) 。 【结果】 【注意事项】 ⒈ 心脏取血：将兔仰卧，以左手拇指在胸骨一侧，食指及中指于胸骨另侧固定心脏，在心 尖 搏动最明显处将针与胸壁垂直刺入胸腔，当持针手感到心脏搏动时，再稍刺入心脏，然后 抽 出血液。取血时，宜用 7 — 8 号针头，针头直出直入，勿在胸腔内左右探索。 ⒉ 为防止凝血，心脏取血时，注射器内先用 0.5% 肝素溶液湿润。 【思考题】 测定药物的半衰期有何临床意义？ 光密度（ x ） 对照管 给药后 5 ′ 管 给药后 35 ′ 管 【注意事项】 ⒈ 心脏取血：将兔仰卧，以左手拇指在胸骨一侧，食指及中指于胸骨另侧固定心脏，在心 尖 搏动最明显处将针与胸壁垂直刺入胸腔，当持针手感到心脏搏动时，再稍刺入心脏，然后 抽 出血液。取血时，宜用 7 — 8 号针头，针头