生物农药实验教案2011..doc

《生物农药》实验 金晨钟 主编 谭显胜 湖南人文科技学院生命科学系前言 生物农药（biopesticides），按照Copping和Menn的定义包含活体微生物（病毒、细菌、真菌），昆虫致病线虫，植物源农药，微生物农药，微生物次生代谢物质（抗生素），昆虫信息素，用于表达抗虫、抗病、抗病毒、耐除草剂的基因以及昆虫天敌。生物农药的独特优点是对人类健康威胁小，对环境安全。这正是全社会最关心的问题之一。进入21世纪以来，各国政府和民众更加重视生物农药的开发和应用，生物农药在整个农药市场的份额正在逐年上升。 我国的天然药物资源十分丰富，为了发现新的活性成分，寻找新的药物，就必须首先从复杂的药物成分中提取出有活性的单体成分，以期为新农药合成提供先导化合物。因此，正确掌握提取分离的实验操作以及熟悉快速、有效的新的提取分离技术在分离目的化合物中就显得尤为重要。 本实验指导书书共分三部分。第一部分是有效成分的提取。内容主要包括溶剂提取法（回流提取、索氏提取）和水蒸气蒸馏法，重点介绍了溶剂提取法的原理和如何选择溶剂，要求掌握回流提取、索氏提取装置和水流气蒸馏装置的正确应用。第二部分主要介绍有效成分的初步分离及其化学成分预测试。内容主要包括薄层层析分离法和有效成分化学预试验方法，要求掌握薄层层析板的制备和正确应用各种分离方法。第三部分是有效成分的生物测定。内容包括生物杀虫剂的生物测定方法（为了突出与化学农药的区别，这里主要介绍驱避、拒食等作用方式的测定方法）、生物农药杀菌剂生物测定方法（孢子萌发法和生长速率测定法）、生物农药抗植物病毒剂（以抗烟草花叶病毒TMV为例）和生物农药除草剂生物测定方法。 生物农药是一门专业性很强的学科交叉课程，学好生物农药，需要同时具备农学、生物学和化学等方面的知识。根据此门课程的特点，结合本科生教学特点的需要，我们编写了此实验指导书。 编者 2011年9月 实验须知 一、牢固树立“安全第一”的思想 1、实验前应充分预习实验内容，了解实验所用药品的性能及危害和注意事项。 2、实验进行时应该注意仪器是否完好无损，装置力求正确稳妥，严格遵守操作规程及实验条件，未经指导老师允许不得擅自改变。 3、保持台面整齐清洁，不得将与实验无关的仪器、书籍、杂物等堆放在实验台上。 4、禁止在实验室吸烟、饮水或吃东西。不得在实验过程中看其它书籍、听广播、玩手机、大声说笑、会客等与实验无关的活动。 5、易燃、易挥发物品不得放在敞口容器中加热。 6、实验进行当中不得擅自离开操作台，如必须暂时离开，应托付他人照看。 7、废酸、废渣、废纸等均应倒入废液缸中，不得倒入水槽。 8、要熟悉安全用具如灭火器、砂桶等的放置地点及使用方法。 9、最后离开实验室者应负责检查实验室的水、电、门、窗、通风设备是否关好。 二、事故的预防和急救 1、爆炸和火灾（1）易燃气体或易燃溶剂的蒸汽在空气中混合到一定比例时，遇到明火、电火花、静电摩擦都会引起爆炸。因此，实验中要有良好的通风；倾倒和量取易燃液体均应在通风橱内进行，远离火源；不得用敞口容器加热、盛装、或蒸除有机溶剂；冷凝水要保持畅通；或进行搅拌或加入沸。 （2）仪器内压力过高造成爆炸。常压操作时，应使全套装置通大气，切勿造成密闭体系；减压蒸馏时，要用圆底烧瓶作接受器，不可用锥形瓶。 如一旦发生火灾，切不可惊慌失措，应保持冷静，采取措施灭火立即报告指导教师，切断电源，选择适当的灭火器材。 2、中毒许多化学溶剂都有不同程度的毒性，溅入口中立即用大量水冲洗。 腐蚀性毒物：对于强酸，先用大量水冲洗，然后服用氢氧化钠铝膏、鸡蛋白；对于强碱也应先用大量的水，然后服用醋、酸果汁、鸡蛋白。 刺激性及神经性毒物：先给牛奶或鸡蛋白冲淡，再给如硫酸镁催吐，立即送医院。 3、外伤与急救割伤：发生原因通常都是因玻璃折断所伤。一旦割伤，用蒸馏水洗净伤口，贴上创可贴或涂上红药水。 烫伤或被火烧伤：轻伤可用苦味酸饱和溶液洗涤后涂以硼酸、凡士林或烫伤膏。 化学试剂灼伤：皮肤被酸或碱灼伤，先用大量水冲洗，然后分别用3%碳酸氢钠或硼酸溶液洗涤。 4、安全用电使用电器时，应防止人体和电器导电部位接触，不能用湿手接触电源插头；如发现仪器有漏电，打火花等现象时，立即断开电源进行检修。实验结束后，应及时断开电源。 目 录 实验一 生物农药中有效成分提取之溶剂提取法——索氏提取.....2 实验二 生物农药中有效成分提取之溶剂提取法——回流提取.......4 实验三 生物农药中有效成分的提取方法——水蒸气蒸馏法..........6 实验四 生物农药有效成分的分离——萃取法（LLE）.................9 实验五 生物农药有效成分的分离