病理切片笔记..doc

病理检验技术讲稿 一、组织切片常用仪器与制片技术 1、切片机及使用 切片机提供石蜡切片（或炭蜡切片）用，是切片中最常用的一种。超薄切片机的构造与使用原理基本也属于这一类型。（图4-1-1） 摇动轮的手柄转动重轮时，传动机内一组齿轮及螺纹中轴，使中轴前端的组织块固定架即按所调节的切片厚度（μm）向前推进，并上下运动，让组织块经过前下方 的轮时，传动机内一组齿轮及螺纹中，使中轴前端的组织块固定架即按所在切片操作 轴前先打开卡锁，否则重轮不能转动。 然后，将组 织块固定于固定架，最后再装切片刀。 组织块及 切片刀先后装牢固后才可掀开卡锁。 慢慢转动重 轮使装有组织块的中轴稍下降到接近刀刃处， 调 整刀的前、后进度，使刀刃即将接触组织块。 调 整刀的进度时，不让刀刃接触组织块， 以免第一 次切到时崩落组织块。此时将组织进度调节器，调 节到20μm，开始切片，待组织块切到所需的组织 图4-1-1 旋转式切片机 断面时，再调节到所需的切片厚度，如5μm或其 它厚度。在装组织块前，可将组织蜡块予以修整；如切成方形的断面使组织周围的空白勿超过1-3mm宽，组织前面的蜡也尽量切去到能清晰看到组织本身，这样在切片机上切片时可节省不少的切片时间。在切片机上切片时，如发现因切片刀有缺口而致组织块出现划痕时，应稍向左、右移动切片刀避开切口，再正式切片。旋转式切片机一般不宜切大块组织（不超过1.8cm），切片时转动重轮的速度也要均匀适宜，太快或太慢均不易切成石蜡连续切片带。结构优良的切片机可在组织块另行处理后能切成1μm厚的“半薄切片”。 切片工作结束后应先卡紧卡锁，再卸下切片刀，最后卸下组织块，做其他处理。 任何切片技术工作者都应养成先卡紧卡锁再在机上操作的良好习惯。这样就完全可以避免切片刀伤人或砸坏组织块及切片刀的事故发生。 脱水机：（图4-1-2） 脱水机是对动物标本按程序浸于各种溶剂进脱水、透明、侵蜡的精密仪器，根据需要，可分别使用不同功能的脱水机。生物组织自动脱水机的脱 水筐体积较大，能同时对120～150块组织进行 脱水并且运转可靠，控温、定时准确，脱水效果 好，使用维修方便，特别是采用单缸揭盖技术， 减少了空气污染等功能。有的机器还有交直流电 源两用，市电停电后，由后备直流电源给整机供 电，完成脱水全过程；有的机器还设有延时加热 的功能，在组织入蜡缸前4小时自动开始加温， 即节约了能源，又延长了机器寿命。还有的机器 还编入了多套程序，可供不同组织、不同的制片 图4-1-2 数显组织自动脱水机 目的选择使用。 3、切片制作技术 1）、取材 组织取材的方法是制作切片的一个重要程序，必须根据教学和科研的具体要求取自人体（外科手术切除标本、活检标本、尸检标本）或动物，并确定取材的部位和方法，否则对组织结构就看不全面。取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识，还要掌握实际操作技术，每个组织器官的取材都有一定的部位和方法，不能任意切取组织作为制片材料，不然，无法达到教学和科研的目的，具体要求如下： (1)、材料新鲜：取材组织愈新鲜愈好（人体组织一般在离体2小时以内取材），动物组织则应在处死后立即取材，并迅速固定，以保证原有的形态学结构。 (2)、组织块的大小：所取组织块较理想的体积为1.8X1.0X0.2cm，以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部，但根据制片材料和目的不同，组织块的较理想体积也不同，如制作病理外检、科研切片，其组织块可以薄取0.1～0.2cm即可，这样可以缩短固定脱水透明的时间，若制作教学切片报厚取0.3～0.5cm，这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。 (3)、勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利，切割时不可来回挫动。夹取组织时切勿过紧，以免因挤压而使组织、细胞变形。 (4)、规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材，如胰腺，一般取胰岛较多的胰腺尾部；脊髓取腰膨大与颈膨大处，病理标本取材按照各病变部位、性质的不同，根据要求规范化取材。 (5)、选好组织块的切面:根据各器官的组织结构，决定其切面的走向。纵或横切往往是显示组织形态结构的关键，如长管状器官以横切为好。 (6)、保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用生理盐水冲洗干净后入固定液。 (7)、保持组织的原有形态:新鲜组织固定后，或多或少产生收缩现象，有时甚至完全变形。为此可将组织展平，以尽可能维持原形。神经、肌肉组织等可将其两端用线扎在木片或硬纸片上固定。 (8)、动物品种的选择:如观察肥大细胞，以取材于大、小鼠皮下组织及肠系膜、大网膜组织直接作铺片为好；内耳、胰岛细胞的观察，多取材于豚鼠的内耳和胰腺；运动终板的观察多取才于小鼠的胁间肌。 2）、固定 （1）、小块组织固定法：从人体或