被标记的DNA（探针）.pptVIP

分子杂交及相关技术 分子杂交,标记的探针DNA变性后与变性后的靶DNA/RNA通过碱基互补配对结合，形成杂种分子的过程 。 分子杂交包括：DNA-DNA杂交，DNA-RNA杂交及蛋白杂交等。 分子杂交的目的就是运用特异的探针鉴定复杂的靶DNA中同源的DNA片段。 双链probe或DNA解链，主要取决于： 1．链的长度：链越长，需要的能量多才能解链； 2．碱基成分：GC含量高，较难变性； 3．化学环境：单价阳离子稳定双链，甲酰胺，尿素破坏双链 probe 探针：在分子杂交中用以检测特异顺序的标记DNA片断。 一、杂交探针的获得 是指一段目的基因或DNA/RNA片段特异杂交的核苷酸序列。 Probe可以是整个基因，或是基因的一部分，是DNA，也可以是RNA。 （一）制备特异性探针所需要的基本条件 1.被检基因结构清楚； 2.有明确的基因产物; 3.已知某一基因产物对表型的反应或缺少某一基因对表型的反应。 具备以上条件之一就可以制备特异性基因探针。 （二）特异探针的来源 1、基因组探针： 从已建立的基因组文库中筛选和分离所需的目的基因。 克隆 扩增 大量的 DNA探针 DNA克隆 2、cDNA probe :从已构建的cDNA文库中筛查和分离目的基因探针。 3、寡核苷酸探针 二、探针的标记 将